高速逆流色谱法分离皂角刺中的抗血管内皮细胞损伤活性成分OA

目的:通过高速逆流色谱法对皂角刺中的化学成分进行分离,同时研究单体成分的抗血管内皮细胞损伤活性。方法:对中药皂角刺氯仿部分进行分离,通过高效液相色谱对不同溶剂体系的分配系数(K)进行比较,选取K最佳溶剂体系,以溶剂体系的上相作为固定相,下相作为流动相,通过高速逆流色谱仪对样品进行分离。采用Tg(fli:EGFP)转基因斑马鱼构建脂多糖(LPS)诱导的血管内皮细胞损伤模型,利用荧光显微成像技术监测内皮细胞增强型绿色荧光蛋白(EGFP)荧光强度变化,评价分离得到的4种单体化合物的血管内皮细胞损伤修复活性。结果:高速逆流色谱法成功实现中药皂角刺氯仿部位样品中4种化合物的同步分离纯化,一次性获得吲哚-3-甲醛、(-)-丁香脂素、4,5-二氢布卢门醇A(4,5-dihydroblumenol A)和ω-羟基丙基愈创木酚酮(ω-hydroxypropioguaiacone)4个单体化合物。4个化合物均为首次从豆科植物和皂荚属植物中分离得到,均对LPS造成的斑马鱼血管内皮细胞损伤有明显的保护和修复功能。结论:高速逆流色谱在天然产物分离中有独特优势,在单次操作中可高效获得多种结构多样的活性成分。分离获取的4,5-dihydroblumenol A表现出良好的血管内皮细胞损伤修复活性,其可作为治疗血管内皮细胞损伤相关疾病的候选药物。