基于网络药理学探讨汉黄芩素对脑缺血再灌注损伤的作用机制OA

基于网络药理学与细胞实验探讨了汉黄芩素(wogonin,WOG)对脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)的神经保护作用及其分子机制。通过SwissTargetPrediction预测WOG的作用靶点,结合GeneCards数据库获取CIRI相关基因,筛选共同靶点并进行GO、KEGG富集分析和蛋白互作网络构建。采用分子对接评估WOG与关键靶点的结合能力。细胞实验采用PC12细胞,设立对照组、氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)组、OGD+WOG组,克隆形成实验检测细胞增殖能力,FerroOrange荧光探针检测Fe^(2+)水平,C11 BODIPY 581/591荧光探针检测脂质过氧化物含量,免疫荧光检测谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)和溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7member 11,SLC7A11)含量,GSH/GSSG试剂盒检测谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量,Western blotting检测花生四烯酸15-脂氧合酶(arachidonate 15-lipoxygenase,ALOX15)蛋白表达水平。结果共获得51个WOG-CIRI共同靶点。GO与KEGG分析显示,靶点显著富集于花生四烯酸代谢通路。分子对接表明,WOG与ALOX15结合良好(结合能-8.6 kcal·mol^(-1))。细胞实验证实,WOG可显著改善OGD诱导的克隆形成抑制,降低Fe^(2+)积累与脂质过氧化水平,提高GSH含量,同时上调GPX4和SLC7A11表达,下调ALOX15表达。综上,WOG可能通过靶向ALOX15,抑制OGD诱导的PC12细胞铁死亡,进而减轻CIRI。