丹参活性成分调控ATP合酶组装因子改善缺氧/复氧心肌细胞能量代谢的机制研究OA

目的 研究丹参活性成分丹参素通过调控组装因子TMEM242改善缺氧/复氧(H/R)心肌细胞能量代谢障碍及减轻细胞损伤的作用机制。方法 将大鼠H9C2心肌细胞分为对照组、模型组和丹参素低、中、高剂量组。除对照组外,其余采用4 h氧糖剥夺+3 h恢复正常培养建立H/R模型,造模过程中,完成4 h氧糖剥夺后,置于缺氧环境,丹参素低、中、高剂量组分别更换含5、10、20µmol/L丹参素的高糖DMEM,模型组仅更换高糖DMEM,再恢复常氧环境继续培养3 h;对照组置于标准培养条件中孵育7 h。应用CCK-8法检测细胞活力,JC-1法检测线粒体膜电位(MMP),ELISA法检测ATP含量及ATP合酶活性,qRT-PCR法检测Bax、TMEM242、ATP6、ATP8 mRNA表达水平。结果 与对照组比较,模型组细胞活力、MMP、ATP含量、ATP合酶活性均显著降低(P<0.01),Bax mRNA表达显著升高(P<0.01),TMEM242、ATP6、ATP8 mRNA表达显著下调(P<0.01)。与模型组比较,丹参素中、高剂量组细胞活力、MMP、ATP含量及ATP合酶活性显著提升(P<0.05,P<0.01),Bax mRNA表达显著降低(P<0.01);丹参素低剂量组则无明显改善作用(P >0.05)。丹参素高剂量组TMEM242、ATP6、ATP8 mRNA表达显著上调(P<0.05)。结论 丹参素呈剂量依赖性地改善H/R心肌细胞活力,减轻线粒体损伤和抑制细胞凋亡,促进能量代谢恢复。其核心机制在于高剂量丹参素通过显著上调ATP合酶关键组装因子TMEM242及其亚基基因(ATP6、ATP8)的表达,促进ATP合酶复合体的有效组装,从而提升ATP合酶活性,增加ATP合成,最终减轻H/R心肌细胞损伤,该作用在10µmol/L丹参素时主要表现为基础能量代谢的改善,而20µmol/L丹参素则能充分激活TMEM242介导的深度组装调控通路。