结核分枝杆菌Hydrolase蛋白是潜在结核病血清学检测标志物OA

目的探究Rv3400基因编码蛋白Hydrolase作为结核病检测标志物的可行性。方法通过生物信息学方法预测该蛋白的空间结构及其基本生物学功能;利用镍树脂纯化E.coli中重组表达的目标蛋白;经Western Blot验证蛋白特异性后,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)评估其在患者血清中的检测敏感性与特异性。结果生物信息学预测Rv3400基因编码的Hydrolase蛋白由262个氨基酸残基构成无信号肽、无跨膜结构域。在E.coli中呈非可溶性表达,镍金属螯合层析可获得纯度为91.8%的重组蛋白。基于ELISA法的该重组蛋白在157名结核病患者和60名健康人群中受试者工作特征(Receiver Operating Characteristic,ROC)曲线下面积(Area Under Curve,AUC)为0.8593,表明该重组蛋白对结核病患者与健康人群区分度差异有统计学意义(P<0.001)。结论重组Hydrolase蛋白可有效识别结核病患者血清样本中的特异性抗体,检测效能突出,具备作为结核病血清检测标志物的临床转化潜力。