基于cAMP/PKA/CREB/BDNF信号通路探讨酸枣仁抗抑郁的作用机制OA

目的本研究通过网络药理学、分子对接和动物实验探讨酸枣仁抗抑郁的作用及机制。方法利用网络药理学构建“化合物-靶点-通路”网络,预测酸枣仁抗抑郁的作用靶点与信号通路,Autodock Tools1.5.7软件进行分子对接。采用孤养结合CUMS来复制抑郁模型,给予酸枣仁水提液(1.95、3.90、7.80 g/kg)进行干预,通过糖水偏好实验、悬尾实验、强迫游泳实验观察小鼠行为学。苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠海马神经元状态;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)及脑源性神经营养因子(BDNF)的含量。Western Blot检测小鼠海马组织蛋白激酶A(PKA)、磷酸化环磷腺苷效应元件结合蛋白(p-CREB)和BDNF蛋白表达水平。实时荧光逆转录定量PCR(RT-qPCR)检测PKA、CREB和BDNF mRNA的表达。结果共筛选得到酸枣仁有效活性成分9个,与抑郁症交集靶基因有103个。GO分析获得300条生物过程,53条细胞组分,107条分子功能,KEGG富集结果显示主要涉及神经活性配体-受体相互作用、cAMP信号通路等。分子对接结果显示酸枣仁中潜在活性成分与AKT1、PKA、CREB蛋白结合效果较好。动物实验研究结果显示,酸枣仁可显著改善CUMS抑郁模型小鼠的抑郁样行为,降低血清中TNF-α、IL-6及IL-1β水平,升高BDNF水平,改善海马神经元损伤。激活cAMP/PKA/CREB/BDNF信号通路,提高PKA、p-CREB和BDNF蛋白表达水平,上调CREB和BDNF mRNA表达水平。结论酸枣仁可改善CUMS模型小鼠的抑郁行为,且其抗抑郁作用可能与抑制促炎症细胞因子水平,激活cAMP/PKA/CREB/BDNF信号通路,保护海马神经元的结构和功能有关。