SOX13激活Wnt/β-catenin信号通路促进子宫内膜癌增殖和转移的作用机制OA

目的 研究性别决定区Y-box转录因子13(SOX13)在子宫内膜癌(EC)中表达的临床意义,以及SOX13通过调控Wnt/β-catenin信号通路促进EC细胞增殖和转移能力的作用机制。方法 收集2017年1月—2020年8月北京大学肿瘤医院内蒙古医院妇科肿瘤科行手术治疗的EC患者80例。采用免疫组织化学(IHC)法检测EC组织中SOX13蛋白的表达,并分析SOX13表达与EC患者临床病理参数及预后的关系;构建SOX13敲减和过表达慢病毒,转染EC细胞,分为sh NC组、sh SOX13组、oe NC组、oe SOX13组;CCK8实验和平板克隆实验检测各组细胞增殖能力;Transwell实验检测各组细胞转移能力;String网站预测SOX13相互作用蛋白,GEPIA数据库分析SOX13与CTNNB1(β-catenin)在EC中表达的相关性;免疫共沉淀(Co-IP)检测SOX13与β-catenin相互作用;TOP/FOP Flash荧光素酶报告基因检测各组细胞荧光素酶活性;Western-blot检测各组细胞Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达。结果 EC患者癌组织中SOX13蛋白阳性表达率高于癌旁组织(χ^(2)/P=6.602/0.010);淋巴脉管间隙浸润(LVSI)、淋巴结转移、FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期的EC患者中SOX13蛋白阳性表达率升高(χ^(2)/P=4.089/0.043、4.641/0.031、8.225/0.004);SOX13阳性表达的EC患者预后较差(χ^(2)/P=5.164/0.023);SOX13敲减转染Ishikawa细胞,过表达慢病毒转染HEC-1-A细胞,与sh NC组比较,sh SOX13组细胞中SOX13蛋白表达降低,细胞增殖、平板克隆形成和转移能力降低(t/P=10.170/<0.001、15.640/<0.001、16.550/<0.001、9.442/<0.001);与oe NC组比较,oe SOX13组细胞中SOX13蛋白表达升高,细胞增殖、平板克隆形成和转移能力增加(t/P=25.320/<0.001、6.600/0.003、28.130/<0.001、17.830/<0.001);数据库分析显示SOX13与CTNNB1(β-catenin)相互作用,在EC中表达呈正相关(r/P=0.480/<0.001);Co-IP显示SOX13与β-catenin存在相互作用;与sh NC组比较,sh SOX13组细胞中TOP/FOP Flash荧光素酶活性降低,细胞中核β-catenin蛋白及c Myc、cyclin D1、N-cadherin蛋白表达降低,E-cadherin蛋白表达增加(t/P=11.770/<0.001、41.830/<0.001、37.200/<0.001、23.000/<0.001、21.620/<0.001、26.840/<0.001);与oe NC组比较,oe SOX13组细胞中TOP/FOP Flash荧光素酶活性增加,细胞中核β-catenin蛋白及c Myc、cyclin D1、N-cadherin蛋白表达增加,E-cadherin蛋白表达降低(t/P=23.970/<0.001、16.620/<0.001、27.650/<0.001、31.140/<0.001、30.000/<0.001、29.440/<0.001)。结论 SOX13在EC中表达增加,与淋巴结转移、LVSI、FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期及不良预后相关,并通过与β-catenin相互作用激活Wnt/β-catenin信号通路增强EC细胞增殖和转移能力。