优化牧草硒蛋白提取条件的研究OA

试验旨在筛选最佳提取剂,通过单因素及响应面法从提取温度、时间和物料比3个维度建立最佳牧草硒蛋白提取条件。选取H_(2)O、0.1 mol/L氢氧化钠(NaOH)、0.1 mol/L氯化钠(NaCl)和0.1 mol/L HCl(盐酸)为提取剂,通过硒蛋白提取率比较筛选最佳提取剂。将温度、时间和物料比固定为40℃、3 h和1∶20,逐一在温度(20~60℃)、时间(1.5~3.5 h)和物料比(1∶10~1∶50)上设置5个水平,3个重复/水平,分步研究3个因素对硒蛋白提取率的影响。在温度(30、40、50℃)、时间(2.0、2.5、3.0 h)和物料比(1∶20、1∶30、1∶40)上设置3个水平、17种水平组合,经响应面分析筛选在3因素协同效应下的最佳提取条件。结果表明:NaOH的提取率[(30.8±2.5)%]显著高于NaCl([19.0±2.0)%]、HCl([14.1±1.6)%]和H_(2)O([12.2±1.5)%(]P<0.05),因此将0.1 mol/L NaOH作为最佳提取剂。温度、时间和物料比对硒蛋白的提取率均有显著影响(P<0.05),且提取率随提取条件的变化均呈现出先升高后降低的变化趋势。提取率最高的提取条件分别为50℃([40.5±3.9)%]、3.0 h([32.3±5.1)%]和1∶30([36.7±5.1)%]。在考虑3因素协调效应时,所建立的响应面模型对数据呈现出较高的拟合值(R^(2)=0.9745,P=9.187×10^(-5))。基于模型求出的极值提取率条件为48.5℃、2.66 h和1∶33.25,极值提取率为42.8%。时间是影响提取率的关键因素(回归系数为时间62.2、温度5.36和物料比4.69)。研究发现,0.1 mol/L NaOH是牧草硒蛋白最佳提取剂,并在单独和协同考虑提取温度、时间和物料比的条件下建立了硒蛋白最佳提取条件。