表没食子儿茶素没食子酸酯对鼻咽癌放疗耐受细胞C666-1R的增敏作用及机制研究OA

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)在体外对人鼻咽癌放疗耐受细胞C666-1R放疗敏感性的影响,并初步分析其相关机制。方法体外培养人鼻咽癌亲本细胞C666-1与放疗耐受细胞C666-1R,通过细胞形态观察与放疗后增殖实验验证C666-1R的放疗耐受表型;采用CCK-8法筛选EGCG干预的最佳工作浓度。将C666-1R细胞分为对照组、放疗组、放疗联合EGCG组,以CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡变化;并采用逆转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)与蛋白质印迹法(Western blot)检测增殖相关分子Cyclin D1、Ki-67及凋亡相关分子Bax、Bcl-2的表达水平;同时采用RT-qPCR检测DNA损伤修复关键基因RAD51、PRKDC、XRCC5的mRNA表达水平。结果形态学与功能实验提示C666-1R细胞较C666-1细胞呈现明显的放疗耐受表型,放疗后增殖抑制效应显著减弱。EGCG对C666-1R细胞增殖具有剂量依赖性抑制作用,预实验筛选后确定150μg/mL为后续联合放疗的工作浓度。与放疗组相比,放疗联合EGCG组细胞增殖率显著降低(P<0.05),凋亡率显著升高(P<0.05);Cyclin D1、Ki-67表达显著下调,Bax表达上调、Bcl-2表达下调(P均<0.05);RAD51、PRKDC、XRCC5的mRNA水平显著下调(P<0.05),提示其可能与DNA损伤修复相关过程受影响有关。结论EGCG在体外可显著增强鼻咽癌放疗耐受细胞C666-1R的放疗敏感性,其机制可能与抑制细胞增殖、促进细胞凋亡以及下调DNA损伤修复相关基因表达有关。其上游调控通路及DNA修复功能改变仍需进一步研究验证。