基于ERα/SIRT1/p53信号通路探讨调更汤对围绝经期抑郁症大鼠抑郁样行为的改善作用OA

目的探讨调更汤对围绝经期抑郁症(PMD)大鼠抑郁样行为的影响。方法将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、17β-E 2组(2.5×10-5 g/kg,皮下注射)及调更汤高、中、低剂量组(38.74、19.37、9.69 g/kg,灌胃),每组8只,采用双侧卵巢切除术(OVX)联合慢性不可预见性温和应激(CUMS)建立PMD大鼠模型,假手术组仅切除等体积脂肪,给药干预28 d。给药结束后,采用糖水偏好实验、旷场实验和强迫游泳实验检测大鼠行为学;ELISA法检测血清性激素(E 2、LH和FSH)及海马组织氧化应激指标(ROS、MDA、SOD、GSH)及Fe 2+水平;HE染色及Nissl染色观察海马组织病理变化;免疫组化法(IHC)检测海马组织4-HNE和GPX4阳性表达;免疫荧光法(IF)观察大鼠海马组织ERα和SIRT1表达;RT-qPCR法检测海马组织ERα、SIRT1、SLC7A11、GPX4、ACSL 4 mRNA表达;Western blot法检测海马组织SIRT1、SLC7A11、GPX4、Ac-p53、p53、ACSL4蛋白表达。结果与模型组比较,调更汤高剂量组和17β-E 2组大鼠糖水偏好指数及旷场实验中总移动距离、平均速度增加(P<0.01),中央区域活动时间延长(P<0.01),强迫游泳不动时间缩短(P<0.01);海马神经元病理损伤得到改善;血清E 2水平升高(P<0.01),LH、FSH水平降低(P<0.05,P<0.01),海马组织GSH水平和SOD、GPX4活性升高(P<0.01),MDA、4-HNE、ROS、Fe 2+水平降低(P<0.05,P<0.01);海马组织4-HNE阳性表达降低(P<0.01),GPX4阳性表达升高(P<0.05,P<0.01);ERα、SIRT1平均荧光强度增强(P<0.01);ERα、SIRT1、SLC7A11、GPX 4 mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01),ACSL 4 mRNA表达降低(P<0.01);SIRT1、SLC7A11、GPX4蛋白表达升高(P<0.01),Ac-p53/p53、ACSL4蛋白表达降低(P<0.01)。结论调更汤能够缓解PMD大鼠的抑郁样行为并发挥神经保护作用,其机制可能与激活ERα/SIRT1/p53信号通路,减少ROS积累,减轻脂质过氧化损伤及铁蓄积,抑制海马神经元铁死亡进程有关。