月见草素B调控PI3K/AKT/NF-κB通路对卵巢癌SKOV3细胞恶性生物学行为的影响OA

目的:探讨月见草素B调控磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/核因子-κB(NF-κB)通路对卵巢癌SKOV3细胞恶性生物学行为的影响。方法:CCK-8法测定月见草素B对SKOV3细胞的半数抑制浓度(IC50),参考IC50值及相关文献确定后续实验剂量。SKOV3细胞分为对照组,月见草素B低(6.25μmol/L)、中(12.5μmol/L)、高(25μmol/L)剂量组,PI3K抑制剂(LY294002)组,月见草素B高剂量+PI3K激活剂(740Y-P)组。CCK-8法、5-乙炔基-2''-脱氧尿苷(EdU)染色法检测各组细胞增殖能力;Transwell侵袭实验、划痕实验、流式细胞术分别检测各组细胞侵袭、迁移能力与凋亡情况;RT-qPCR检测各组细胞中增殖相关基因细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、迁移相关基因迁移侵袭增强子1(MIEN1)及凋亡相关基因p53 mRNA表达情况;Western blotting检测各组细胞中PI3K/AKT/NF-κB通路相关蛋白p-PI3K、p-AKT、NF-κB p65的表达。结果:月见草素B处理SKOV3细胞24 h的IC_(50)值为28.70μmol/L。与对照组相比,月见草素B低、中、高剂量组及LY294002组SKOV3细胞增殖能力、侵袭细胞数及划痕愈合率均降低(均P<0.05),Cyclin D1、MIEN1 mRNA及p-PI3K、p-AKT、NF-κB p65蛋白表达下调(均P<0.05),而细胞凋亡率与p53 mRNA表达则升高(均P<0.05);与LY294002组相比,高剂量月见草素B对SKOV3细胞增殖能力、侵袭细胞数及划痕愈合率的抑制作用更显著(均P<0.05),对Cyclin D1、MIEN1 mRNA及p-PI3K、p-AKT、NF-κB p65蛋白的下调及对细胞凋亡率与p53 mRNA表达的上调均更明显(均P<0.05)。与月见草素B高剂量组相比,月见草素B高剂量+740Y-P组SKOV3细胞增殖能力、侵袭细胞数及划痕愈合率升高(均P<0.05),Cyclin D1、MIEN1 mRNA及p-PI3K、p-AKT、NF-κB p65蛋白表达上调(均P<0.05),细胞凋亡率与p53 mRNA表达降低(P<0.05)。结论:月见草素B可能通过抑制PI3K/AKT/NF-κB通路,抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭与迁移,并诱导细胞凋亡。