网膜素1通过PI3K/Akt途径上调ABCA1表达促进胆固醇流出OA

[目的]探讨网膜素1对巨噬细胞ATP结合盒转运体A1(ABCA1)表达及其介导的胆固醇流出的影响,并阐明其调控机制。[方法]采用网膜素1孵育THP-1源性巨噬细胞24 h后,分别抑制和沉默磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和蛋白激酶B(Akt),采用Western blot检测ABCA1、肝X受体α(LXRα)等蛋白水平,通过高效液相色谱法测定细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)及胆固醇酯(CE)含量,应用液体闪烁计数仪检测胆固醇外排,采用油红O染色观察细胞内脂滴情况。为深入探讨其作用机制,采用ABCA1特异性siRNA沉默技术,观察网膜素1对胆固醇流出的影响。[结果]网膜素1呈剂量依赖性地增强巨噬细胞ABCA1的表达,促进胆固醇外排,降低细胞内TC、FC和CE的含量,减少脂质蓄积并抑制泡沫细胞形成。特异性沉默ABCA1表达后,网膜素1促进胆固醇外排的效应显著减弱,细胞内脂质蓄积增加,泡沫细胞形成明显增多。抑制或沉默PI3K与Akt后,LXRα和ABCA1的表达显著下调,网膜素1促胆固醇外排效应受到抑制,细胞内脂质蓄积增加,泡沫细胞形成增多。[结论]网膜素1可通过PI3K/Akt途径上调巨噬细胞ABCA1的表达,增强胆固醇外排,进而减少脂质蓄积并抑制泡沫细胞形成。