基于质谱分析和网络药理学的伊贝母总生物碱治疗肺纤维化作用及机制研究OA

探究伊贝母总生物碱(total alkaloids of Fritillariae Pallidiflorae Bulbus,FPB-TA)抑制肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)的有效成分及作用机制。本研究利用HPLC-Q-TOF-MS/MS和LC-MS/MS技术对FPB-TA进行成分分析。通过TCMSP等数据库筛选伊贝母治疗PF的潜在靶点;利用STRING数据库构建蛋白互作网络;对核心靶点进行GO生物功能注释和KEGG通路富集;分子对接技术模拟伊贝母中生物碱成分与关键靶点的结合能力。此外,通过转化生长因子β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)诱导构建A549细胞的PF体外模型,并利用Western blot和天狼星红染色等方法验证FPB-TA对PF的治疗作用及机制验证。结果表明,经质谱分析鉴定出24类241个化合物,9个生物碱的含量占总生物碱含量的55.362%。网络药理学共获得交集靶点115个,蛋白质相互作用分析筛选后获得22个靶点,181条相互作用边,KEGG富集涉及Ras相关蛋白1(Ras-related protein 1,RAP1)信号通路、癌症通路、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路等,综合考虑选取RAP1信号通路进行研究。筛选出活性成分中的生物碱成分与RAP1信号通路中的关键蛋白RAP1B进行分子对接,结果显示活性成分与关键蛋白结合力良好。体外实验表明,FPB-TA可以有效地改善TGF-β1刺激的A549细胞的胶原沉积,并且可以有效抑制RAP1B蛋白的表达。本研究揭示了FPB-TA中的化学成分,并探索了其延缓PF潜在的分子机制,为后续深入探讨其作用机制提供理论依据和研究方向。