基于AGE-RAGE/TGF-β1信号通路探究红石榴-牡丹花组合物抗皮肤衰老功效OA

研究旨在通过网络药理学、分子对接和实验验证探究红石榴-牡丹花组合物(red pomegranate-peony flower extract,RPP)抗皮肤衰老及其作用机制。采用超高效液相色谱-质谱联用技术对RPP的主要活性成分进行鉴定。基于TTD和GeneCards数据库筛选与皮肤糖化相关的潜在基因靶点,利用蛋白质相互作用网络分析筛选核心靶点。进一步对核心靶点进行GO和KEGG通路富集分析,构建“活性成分-靶点-通路”多层次网络,并通过分子对接技术验证活性成分与关键靶点的结合能力。分别采用叔丁基过氧化氢和甲萘醌诱导斑马鱼氧化应激模型,检测活性氧水平和卵黄囊色素沉积情况;构建体外糖基化模型,通过生化指标检测评估抗糖化活性;利用葡萄糖-果糖混合溶液诱导线虫糖化模型,评估其对糖化相关表型的影响;采用丙酮醛诱导人真皮成纤维细胞糖化模型,检测细胞水平上的糖化损伤及干预效果。网络药理学和分子对接预测RPP可能通过减缓晚期糖基化终产物-晚期糖基化终产物受体(advanced glycation end products-receptor for advanced glycation end products,AGE-RAGE)信号通路,减少细胞外基质的纤维化,调节基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)的表达,进而防止胶原蛋白和弹性蛋白的降解,从而减缓皮肤衰老。实验结果表明,RPP能显著降低斑马鱼活性氧积累(P<0.001),并能显著抑制氧化应激诱导的斑马鱼卵黄囊色素生成(P<0.05),具有抗氧化作用。RPP还能抑制晚期糖基化终末产物的生成(抑制率62.25%±0.17%),显著降低线虫戊糖素(P<0.001)含量和增加Ⅻ型胶原蛋白(collagen XII,col-12)mRNA(P<0.05)表达量;显著降低人真皮成纤维细胞中戊糖素和羧甲基赖氨酸酶的含量(P<0.001),具有抗皮肤糖化作用。RPP通过调控AGE-RAGE/转化生长因子-β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)信号通路,同步抑制MMP1和MMP3表达,构建细胞外基质稳态,并减少氧化应激与糖化损伤,从而发挥抗皮肤衰老效应。