淫羊藿苷对高脂饮食诱导小鼠睾丸支持细胞紧密连接功能损伤的保护作用及机制OA

探究淫羊藿苷对高脂饮食诱导小鼠睾丸支持细胞紧密连接功能损伤的保护作用及机制。7周龄的C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常饮食组、高脂饮食模型组、淫羊藿苷低剂量组(3 mg/kg)、中剂量组(9 mg/kg)和高剂量组(27 mg/kg)。收集小鼠睾丸、附睾和精囊腺,计算脏器指数并检测精子浓度和活率;ELISA检测天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、γ-谷氨酰转移酶(gamma-glutamyl transferase,γ-GT)及血糖(glucose,GLU)水平以评估肝功能;HE染色观察小鼠睾丸形态学变化;Western blot检测睾丸紧密连接相关的闭合小带蛋白-1(zonula occludens-1,ZO-1)、闭锁蛋白(Occludin)和闭合蛋白-11(Claudin-11)的表达水平。体外采用棕榈酸处理小鼠睾丸支持细胞株(TM4)以构建紧密连接损伤模型,CCK-8法检测细胞活力并筛选淫羊藿素干预的低、中、高剂量分别为0.2、0.4、0.8μmol/L;Western blot检测TM4细胞紧密连接相关蛋白、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-18及核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)/核苷酸结合寡金属样受体蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)通路相关蛋白表达水平;跨上皮电阻和异硫氰酸荧光素-葡聚糖检测细胞通透性;RT-qPCR检测炎症因子TNF-α、IL-6、IL-33 mRNA表达水平。动物实验结果显示,淫羊藿苷可显著提高模型组小鼠附睾指数、精子浓度和活率,改善睾丸组织形态和异常血清生化指标,上调紧密连接相关蛋白表达水平。体外实验结果显示,淫羊藿素可上调TM4细胞紧密连接相关蛋白表达,改善细胞通透性,并抑制TNF-α、IL-6、IL-33炎性因子mRNA表达水平及NF-κB/NLRP3通路相关蛋白表达水平。综上,淫羊藿苷可改善高脂饮食诱导小鼠睾丸支持细胞紧密连接功能损伤,其机制可能与减轻NF-κB/NLRP3信号通路介导的炎症反应有关。