肾衰康复颗粒高效液相色谱指纹图谱建立与多成分定量分析OA

目的建立肾衰康复颗粒的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并测定制剂中秦皮乙素、新落新妇苷、蒙花苷、大黄酸的含量。方法色谱柱为Shimadzu Wondasil C_(18) Superb柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为344 nm(秦皮乙素)、291 nm(新落新妇苷)、254 nm(蒙花苷)、254 nm(大黄酸),柱温为30℃,进样量为10μL。通过中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)建立12批样品的HPLC叠加指纹图谱,并进行相似度评价。结果12批样品的HPLC叠加指纹图谱的相似度为0.980~0.999,共标定22个共有峰,指认出峰5、峰12、峰18、峰20、峰22分别为秦皮乙素、新落新妇苷、蒙花苷、大黄酚-8-O-葡萄糖苷、大黄酸。秦皮乙素、新落新妇苷、蒙花苷、大黄酸的质量浓度分别在5.12~102.33μg/mL、5.18~103.59μg/mL、2.29~45.76μg/mL、1.05~20.91μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=1.0000,n=5);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于2.0%;平均加样回收率分别为104.10%,101.17%,97.95%,104.22%,RSD分别为0.23%,0.48%,0.24%,0.60%(n=6)。12批样品中,上述4种成分的含量分别为0.3324~0.4188 mg/g、0.3153~0.6058 mg/g、0.2785~0.3488 mg/g、0.0505~0.0864 mg/g(n=2)。结论所建立的方法操作简便、结果准确、专属性强,可用于肾衰康复颗粒的质量评价。