鱼腥草乙醇提取物抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路减轻LPS刺激NP69细胞炎症反应的机制研究OA

目的:探讨鱼腥草乙醇提取物(HCT)对脂多糖(LPS)诱导的人鼻咽上皮细胞NP69炎症反应及紧密连接蛋白表达的影响,并分析其与Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子κB(NF-κB)通路的关系.方法:以LPS诱导NP69细胞炎症损伤,设立空白对照组、LPS模型组、HCT低中高剂量组(0.05、0.10、0.20 mg/ml)、地塞米松(Dex)组、TAK-242组(TLR4抑制剂TAK-242 1μmol/L)及TAK-242+HCT组(联合使用TLR4抑制剂1μmol/L+HCT 0.20mg/ml).采用MTS、酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、蛋白质印迹法(Western Blot)和双荧光素酶报告实验检测细胞活力、炎症因子、通路活化及紧密连接蛋白表达.结果:LPS刺激后NP69细胞活力明显下降,HCT可改善细胞活力,抑制肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)释放及相关基因表达,下调TLR4、MyD88、磷酸化核因子κB抑制蛋白α(p-IκBα)和NF-κB p65表达,并上调闭锁小带蛋白1(ZO-1)和紧密连接蛋白(occludin)表达.结论:HCT可能通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路活化减轻炎症反应,并促进上皮屏障功能恢复.