人神经母细胞瘤细胞线粒体相关内质网膜的提取和分离OA
Isolation and extraction of mitochondria-associated endoplasmic reticulum membranes from human neuroblastoma SH-SY5Y cells
目的 建立一种高纯度的提取分离线粒体相关内质网膜(mitochondria-associated endoplasmic reticulum membranes,MAMs)的实验方法,为开展MAMs相关研究及其提取工作提供可行方案.方法 培养人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y),消化处理并收集细胞沉淀;将细胞沉淀重悬于分离缓冲液-1,冰上研磨,镜检细胞破碎达80％～90％完成研磨;在4℃下逐步差速离心获得粗线粒体,最后经超速离心分离获得MAMs、纯线粒体;最后对各分离组分进行电镜和Western blot验证.结果 提取分离的MAMs均匀单一,杂质少,纯度高,达到后续实验要求.结论 该方法所需试剂和设备较为简单,提取分离的MAMs纯度高、质量佳,是一种实用的MAMs分离提取方法,可为后续疾病建模与分子机制等研究提供可靠方案.
朱双;卢永恒;赵飞艳;杨丽平;刘艳洁;魏娜
贵州医科大学临床医学院病理学教研室,贵阳 550004贵州医科大学临床医学院病理学教研室,贵阳 550004贵州医科大学临床医学院病理学教研室,贵阳 550004贵州医科大学临床医学院病理学教研室,贵阳 550004贵州医科大学临床医学院病理学教研室,贵阳 550004||贵州医科大学附属医院病理科,贵阳 550004贵州医科大学临床医学院病理学教研室,贵阳 550004||贵州医科大学附属医院病理科,贵阳 550004
医药卫生
线粒体相关内质网膜纯线粒体分离SH-SY5Y
mitochondria associated endoplasmic reticulum membranespure mitochondriaisolationSH-SY5Y
《临床与实验病理学杂志》 2026 (5)
683-685,3
国家自然科学基金(82360672)、贵州省科技计划项目[黔科合基础-ZK(2022)一般439] National Natural Science Foundation of China(82360672)Guizhou Provincial Science and Tech-nology Plan Project[ZK(2022)439]
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