常绿钩吻碱壳聚糖微乳温敏凝胶的体外性质、安全性及抗脑胶质瘤活性研究OA

目的 对常绿钩吻碱壳聚糖微乳温敏凝胶(SPV-CTMH)的体外性质、安全性及抗脑胶质瘤活性进行研究.方法 采用恒温磁力搅拌法制备常绿钩吻碱(SPV)微乳,结合冷溶法制备泊洛沙姆(P)407/P188温敏凝胶,并加入壳聚糖成功构建SPV-CTMH.通过高温[(40±2)℃]、强光(4 500 Lux)和长期[温度(25±2)℃、相对湿度(60±5)%、6个月]试验考察SPV-CTMH的稳定性;采用Franz扩散池法考察SPV-CTMH体外释放行为;建立蟾蜍上颚模型,考察纤毛持续摆动时间(PVD)和相对PVD百分率,并观察纤毛形态评价其纤毛毒性;同时,应用SD大鼠连续滴鼻模型,观察体质量、挠鼻和打喷嚏频次等行为学表征以及鼻黏膜组织病理学变化,综合评价制剂安全性;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法考察SPV-CTMH对神经胶质瘤U251细胞的抑制作用.结果 稳定性考察显示,SPV-CTMH在高温、强光和长期留样考察中,其外观性状稳定,pH值和载药量均无统计学差异(P＞0.05),具备良好稳定性.体外释药结果显示,与SPV溶液比较,SPV-CTMH具有双相释药特性,前期(0～8 h)快速释放以提供局部负荷剂量,后期平稳持久缓释,48 h累积释放率约90%.释药曲线符合Higuchi释放模型(Q=13.37t1/2-8.05,R2=0.982 7).安全性评价显示,SPV-CTMH组的PVD为(590.87±3.67)min,相对PVD百分率为(90.71±0.39)%,其安全性与呋麻滴鼻液相当(P＞0.05);生物显微镜下见纤毛致密饱满、排列整齐,未见剥脱.大鼠滴鼻1周内体质量稳定增长,无全身系统性毒性;与生理盐水组和呋麻滴鼻液组比较,SPV-CTMH组挠鼻和打喷嚏频次总和差异均无统计学意义(P＞0.05);组织病理学显示其鼻黏膜上皮结构完整,无充血、水肿及炎性细胞浸润.SPV-CTMH对U251细胞呈浓度依赖性的增殖抑制作用,其半数抑制浓度(IC50)为(3.03±0.19)μmol/L,与SPV溶液的IC50(3.04±0.21)μmol/L相当,2组抑制率无统计学差异(P＞0.05).结论 SPV-CTMH制备工艺可行且理化性质稳定,具备良好的缓释特性和鼻腔生理相容性,在安全递药的同时能高效保留SPV的抗脑胶质瘤活性,是一种极具潜力的脑靶向新型无创递药系统方案.