基于AMPK/SIRT1通路探讨槲皮素通过“能量-纤维化-衰老”途径改善高血压肾损害的作用及机制OA

探究槲皮素通过“能量-纤维化-衰老”途径对高血压肾损害的保护作用。采用网络药理学方法,预测槲皮素与高血压肾损害之间的共同靶点,并进行KEGG通路富集分析。设Wistar Kyoto(WKY)大鼠为对照组,将自发性高血压大鼠随机分为模型组、槲皮素低剂量组(2.5 mg/kg)、槲皮素高剂量组(10 mg/kg),对照组和模型组给予甲基纤维素进行灌胃,连续灌胃4周后,提取大鼠肾组织样本,进行组织HE染色、Masson染色、PAS染色。使用血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)刺激大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)作为细胞模型,进行CCK-8、免疫荧光、流式细胞术、免疫印迹等实验验证。网络药理学结果提示,腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine 5''-monophosphate-activated protein kinase,AMPK)信号通路可能在槲皮素改善高血压肾损害中发挥重要作用;体内实验表明,槲皮素可有效降压,减轻肾脏结构病理改变,减少肾损害。在体外实验中发现,槲皮素通过激活AMPK及其下游沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1),提高细胞三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)含量,减少线粒体膜电位下降,降低活性氧(reactive oxygen species,ROS)表达水平,维持线粒体能量代谢稳态。并通过降低间充质标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达,提高上皮标志物上皮型钙黏附蛋白(E-cadherin)的表达,降低纤维化标志物I型胶原蛋白(Collagen I)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)的表达,抑制上皮-间质转化过程,改善纤维化程度。通过降低衰老标志物肿瘤蛋白P53、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A(cyclin-dependent kinase inhibitor 2A,CDKN2A/P16)的表达,干预衰老进程。综上,槲皮素能够减轻高血压肾损害,通过“能量-纤维化-衰老”途径,激活AMPK/SIRT1通路可能是其潜在机制。