基于UPLC-Q/Orbitrap HRMS和网络药理学的恰玛古抗高尿酸血症研究OA

基于超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法(ultra performance liquid chromatography-quadrupole/orbitrap high-resolution mass spectrometry,UPLC-Q/Orbitrap HRMS)结合网络药理学和斑马鱼实验分析恰玛古治疗高尿酸血症(hyperuricemia,HUA)的潜在作用机制和成分。首先通过测定恰玛古不同提取部位的体外黄嘌呤氧化酶抑制率,筛选出抑制效果较好的提取部位并通过UPLC-Q/Orbitrap HRMS测定其组成成分,并结合网络药理学探究其治疗HUA的潜在作用机制,最后通过斑马鱼实验对所筛选出的靶点进行验证。结果表明,恰玛古最佳降尿酸部位为70%乙醇提取部位,从中共计鉴定出76个化合物,其中37个潜在活性成分,主要通过磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)信号通路等通路发挥作用,分析得到三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(adenosine triphosphate-binding cassette transporter protein G2,ABCG2)、有机阴离子转运体1(organic anion transporter 1,OAT1)和尿酸转运蛋白1(urate anion transporter 1,URAT1)等共8个核心靶点以及甜橙黄酮、棕榈酸和苯乙基2-葡糖苷等9个核心成分,分子对接结果显示核心成分与核心靶点具有较高的亲和力,最后通过斑马鱼实验验证发现,在与高尿酸血症(HUA)直接相关的靶点中,恰玛古70%乙醇提取物可显著上调degree值最高的靶点OAT1的表达水平。综上,该研究为恰玛古降尿酸成分的研究奠定了基础,初步揭示其治疗HUA的机制,为下一步深入研究提供了理论依据。