基于网络药理学及实验验证探究少腹逐瘀汤活性成分干预原发性痛经的作用机制OA

基于网络药理学及实验验证探究少腹逐瘀汤(Shaofu Zhuyu Decoction,SZD)活性成分干预原发性痛经的作用机制。通过多数据库整合策略筛选SZD活性成分及其潜在靶点,并与原发性痛经(primary dysmenorrhea,PD)相关靶点取交集。构建成分–靶点及蛋白互作网络筛选核心靶点,通过GO与KEGG富集分析解析关键通路,并结合分子对接验证其作用机制。进一步以脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人子宫内膜间质细胞炎症模型为基础,检测白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP9)mRNA及磷酸化核因子-κB p65亚基(phosphorylated nuclear factor-κB p65,p-NF-κB p65)、钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(calcium/calmodulin-dependent protein kinase II,CaMKII)蛋白表达,验证其抗炎机制。共筛选出197个活性成分与597个潜在靶点,交集中得到37个PD相关治疗靶点。网络分析表明槲皮素、山柰酚、芍药苷、黄芩素等为关键成分,核心靶点包括TNF、IL-6、MMP9、雌激素受体α(estrogen receptor alpha,ESR1)、前列腺素内过氧化物合酶2(prostaglandin-endoperoxide synthase 2,PTGS2)等。GO分析显示主要富集于炎症因子活性、类固醇应答与免疫反应调节;KEGG通路富集结果提示,IL-17信号通路、TNF信号通路、雌激素信号通路等为主要作用通路,IL-17A通路核心靶点包括IL-6、TNF、MMP9。分子对接显示关键成分与靶点结合能均低于−5.0 kcal/mol,具有良好结合能力。体外实验结果显示,LPS刺激显著上调IL-6、TNF、MMP9 mRNA及p-NF-κB p65、CaMKII蛋白表达(P<0.05),验证模型构建成功。SZD干预显著降低IL-6、TNF mRNA表达及p-NF-κB p65蛋白水平(P<0.05),但对MMP9和CaMKII表达无显著影响(P>0.05)。综上,SZD可能通过多种活性成分协同作用,靶向调控IL-17A信号通路中IL-6、TNF等关键因子,发挥抗炎和改善子宫内膜炎性微环境的作用。