驴源马链球菌兽疫亚种SYYZ44.1的分离鉴定及致病性研究OA
Isolation,identification,and pathogenicity of a Streptococcus equi subsp.zooepidemicus isolate SYYZ44.1 of donkey origin
本试验旨在明确新疆喀什某驴场下颌淋巴结肿胀的致病菌并探究其生物学特性.从48份患病驴鼻拭子样品中分离病原菌,用绵羊鲜血培养基分离纯化,经革兰染色、镜检及生化特性初步鉴定,采用PCR扩增16S rDNA基因,以BLAST比对和MEGA 7.0软件绘制遗传进化树进行同源性分析,再经PCR扩增鉴定毒力基因,进行小鼠致病性试验,观察小鼠症状和统计死亡率,测定半数致死量(LD50),最后采用K-B纸片法考察菌株对6类12种药物的敏感性.结果显示,从48份鼻拭子样品中均分离到具有β溶血特性的革兰阳性链球菌,选取1株分离株进行深入研究;16S rDNA PCR扩增产物测序比对显示,该分离菌株与新疆马源兽疫链球菌(JQ726499.1和MT815608.1)同源性达99%且在同一分支,命名为SYYZ44.1;毒力基因检测显示该分离菌株携带FneB、LytA和SeM基因;药敏试验K-B纸片法检测表明,该菌株对β-内酰胺类抗生素氨苄西林、阿莫西林和利福平高度敏感,对环丙沙星、诺氟沙星、四环素等敏感性较低.本研究成功分离获得1株驴源兽疫链球菌,命名为SYYZ44.1,该菌株对小鼠表现出较强的致病性,药敏试验提示临床防治可优先选用β-内酰胺类抗生素.本研究结果为进一步防控由驴源兽疫链球菌引起的驴腺疫提供了理论依据.
To investigate the pathogenic bacteria of donkey strangles and their biological characteristics in a donkey farm in Kashgar,Xinjiang,this study isolated pathogenic bacteria from 48 nasal swab samples of suspected diseased donkeys.The isolates were purified using sheep blood agar,followed by preliminary identification through Gram staining,microscopic examination and biochemical characterization.Homology analysis was performed via PCR amplification of the 16S rDNA gene,BLAST alignment and phylogenetic tree construction using MEGA 7.0 software.Virulence genes were identified by PCR amplification.Mouse pathogenicity tests were conducted to observe clinical symptoms and mortality,and the median lethal dose(LD50)was determined.The Kirby-Bauer(K-B)disk diffusion method was used to evaluate the antimicrobial susceptibility of the isolate against 12 drugs belonging to 6 categories.The results showed that the isolates of Gram-positive Streptococcus with β-hemolytic activity were isolated from 48 nasal swab samples and a single isolate was selected for intensive research.Sequencing and alignment of the 16S rDNA PCR amplification product revealed that this isolate shared 99%homology with horse-derived Streptococcus equi subsp.zooepidemicus(SEZ)strains from Xinjiang(accession numbers:JQ726499.1 and MT815608.1)and clustered in the same phylogenetic branch,thus being designated as SYYZ44.1.Virulence gene detection indicated that the strain carried FneB,LytA and SeM genes.Antimicrobial susceptibility testing via the K-B method demonstrated that the bacterium was highly sensitive to β-lactam antibiotics(ampicillin,amoxicillin)and rifampicin,but showed low susceptibility to quinolones(ciprofloxacin,norfloxacin)and tetracyclines.In conclusion,this study successfully isolated a donkey-derived Streptococcus equi subsp.zooepidemicus strain named SYYZ44.1,which exhibited strong pathogenicity in mice.β-lactam antibiotics are recommended as the preferred clinical treatment option.The findings of this study provide a theoretical reference for the prevention and control of donkey strangles caused by donkey-derived Streptococcus equi subsp.zooepidemicus infection.
高函雅;赵雪婷;靳文婷;王馨;赛福丁·阿不拉;阿得力江·吾斯曼;买占海;张伟;刘丹丹;付恩宁;魏晓龙;罗洁;何莹;吴勇;徐李依娜;崔舒溶;郝宝山
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农业科技
驴腺疫马链球菌兽疫亚种毒力基因致病性药敏试验
donkey stranglesStreptococcus equi subsp.zooepidemicusvirulence genespathogenicityantimicrobial susceptibility test
《中兽医医药杂志》 2026 (3)
14-21,封2,9
国家自然科学基金项目(32460901)中央引导地方科技发展专项资金项目(ZYYD2023C03)2023年新疆维吾尔自治区青年基金(2023D01B31)"新疆草食动物新药研究与创制"重点实验室2024开放课题(XJCDVM-HDRC-S202420)新疆维吾尔自治区大学生创新训练计划项目(S202510758013)
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