表达O型口蹄疫病毒中和抗体转基因细胞系的构建与应用OA
Development and application of transgenic cell lines expressing neutralizing antibodies against foot-and-mouth disease virus serotype O
探究体外构建的、可表达口蹄疫病毒(FMDV)中和抗体的细胞系,是否能够发挥抑制该病毒感染与复制的作用.首先,构建以单链抗体(scFv)形式表达FMDV中和抗体的载体质粒.为了进一步提高中和抗体分泌到胞外的效率,在该表达载体中分别插入了4种分泌型信号肽的表达序列.通过脂质体转染法将各个表达载体转入BHK-21细胞,经嘌呤霉素抗性筛选,成功构建了相应的稳定转基因细胞系.借助Western-blot、TCID50等试验方法,对FMDV在各转基因细胞系的复制水平进行了系统检测与评估.结果显示,携带mIg κ信号肽的细胞系对BHK-21细胞内FMDV的复制具有显著抑制效果,且病毒感染所导致的细胞病变程度明显减轻.这些结果表明,在体外培养的细胞中转入scFv形式的中和抗体,可以显著抑制FMDV的复制,为家畜疫病的防控提供了新思路.
This study aimed to investigate whether cell lines expressing foot-and-mouth disease virus(FMDV)neutralizing antibodies(NAbs)could inhibit viral infection and replication.First,plasmids expressing FMDV NAbs in the form of single-chain fragments variable(scFv)were constructed.To further enhance the secretion efficiency of NAbs into the extracellular space,four secretory signal peptides were added into each scFv.The expression vectors were transfected into BHK-21 cells via liposome-mediated transfect ion,fol lowed by puromycin selection to obtain the corresponding transgenic cell lines.Subsequently,FMDV replication in the transgenic cell lines was assessed using Western-blot and TCID50 assays.Results demonstrated that the mIg κ-signal peptide-tagged NAbs significantly inhibited FMDV replication in BHK-21 cells,and the degree of cytopathic effect induced by viral infection was markedly reduced.These findings indicate that scFv-formulated NAbs can potently suppress FMDV replication in vitro,offering novel insights for controlling livestock epidemics.
杨彪;冯涛;包世俊;郑海学;齐晓兰;吴国华;晏子龙;郝荣增;郑东东;谢正杰;刘宝;闫祯芳
甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州 730070||中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室,甘肃兰州 730000||甘肃省病原生物学基础学科研究中心,甘肃兰州 730046中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室,甘肃兰州 730000||甘肃省病原生物学基础学科研究中心,甘肃兰州 730046甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州 730070中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室,甘肃兰州 730000||甘肃省病原生物学基础学科研究中心,甘肃兰州 730046中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室,甘肃兰州 730000||甘肃省病原生物学基础学科研究中心,甘肃兰州 730046中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室,甘肃兰州 730000||甘肃省病原生物学基础学科研究中心,甘肃兰州 730046中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室,甘肃兰州 730000||甘肃省病原生物学基础学科研究中心,甘肃兰州 730046中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室,甘肃兰州 730000||甘肃省病原生物学基础学科研究中心,甘肃兰州 730046中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室,甘肃兰州 730000||甘肃省病原生物学基础学科研究中心,甘肃兰州 730046中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室,甘肃兰州 730000||甘肃省病原生物学基础学科研究中心,甘肃兰州 730046中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室,甘肃兰州 730000||甘肃省病原生物学基础学科研究中心,甘肃兰州 730046中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室,甘肃兰州 730000||甘肃省病原生物学基础学科研究中心,甘肃兰州 730046
农业科技
口蹄疫病毒中和抗体单链抗体转基因细胞系
foot-and-mouth disease virusneutralizing antibodysingle-chain antibodytransgenic cell lines
《中国兽医科学》 2026 (5)
578-586,9
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