左归丸联合电针对肌少症模型小鼠骨骼与肌肉的影响及其作用机制研究OA

目的:探讨左归丸联合电针治疗对肌少症模型小鼠骨骼及肌肉的干预作用,并探索其作用机制.方法:6月龄C57BL/6J小鼠50只,随机选取10只作为正常组,另40只通过注射地塞米松构建肌少症模型.将造模成功的小鼠随机分为模型组、左归丸组、电针组和针药联用组.左归丸组每日给予6 g/kg左归丸混悬液灌胃(每日1次),电针组予双侧合谷、曲池、足三里电针治疗(每日1次,每次20min),针药联用组每日给予左归丸灌胃、电针治疗(方法同左归丸组、电针组),正常组、模型组每日灌胃给予等体积生理盐水(每日1次),各组均连续灌胃/治疗4周.运用抓力测试仪检测各组小鼠前肢肌力;采用生化分析仪测定各组小鼠血清碱性磷酸酶(ALP)、钙(Ca)以及磷(P)含量;使用Micro CT技术观察各组小鼠左侧股骨三维剖面情况,并检测骨密度、连接密度、骨体积分数、骨小梁厚度等骨微结构;使用HE染色法观察各组小鼠后肢肌肉与骨骼组织病理改变;运用蛋白质免疫印迹法(Western blot法)检测每组3只小鼠后肢肌肉组织胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、白细胞介素-6(IL-6)、瘦素和骨保护素(OPG)的蛋白相对表达量.结果:模型组小鼠肌力明显低于正常组(P＜0.01),各治疗组小鼠肌力明显高于模型组(P＜0.01),针药联用组小鼠肌力明显高于左归丸组、电针组(P＜0.01).模型组小鼠血清ALP、Ca、P含量均明显低于正常组(P＜0.01);针药联用组小鼠上述指标均明显高于模型组(P＜0.01)和电针组(P＜0.05,P＜0.01),针药联用组小鼠血清ALP、P明显高于左归丸组(P＜0.05,P＜0.01).模型组小鼠股骨骨小梁断裂、变短,网状结构退化,空隙形成;肌纤维结构不规则,排列紊乱,横截面积明显缩小.左归丸组和电针组小鼠骨小梁较模型组间距更小,厚度更厚,有部分连接断点;骨骼肌肌纤维结构较模型组更加规则.针药联用组小鼠骨小梁基本完整;骨骼肌肌纤维结构基本规则完整,骨骼肌细胞形状趋近于规则的圆形.模型组小鼠股骨骨密度、连接密度、骨体积分数、骨小梁厚度均明显低于正常组(P＜0.05,P＜0.01);针药联用组小鼠上述指标均明显高于模型组(P＜0.05,P＜0.01),其中骨密度和骨小梁厚度明显高于电针组(P＜0.05).模型组小鼠骨骼肌组织IL-6、IGF-1蛋白相对表达量明显高于正常组(P＜0.05,P＜0.01),瘦素、OPG蛋白相对表达量明显低于正常组(P＜0.05,P＜0.01);针药联用组小鼠骨骼肌组织IL-6蛋白相对表达量明显低于模型组和电针组(P＜0.05),瘦素、OPG蛋白相对表达量明显高于模型组(P＜0.05),IGF-1蛋白相对表达量明显低于左归丸组(P＜0.05).结论:左归丸联合电针能明显改善肌少症模型小鼠肌力、骨骼、肌肉病变,推测其可能通过调节钙磷代谢,抑制炎症因子IL-6,上调骨骼肌中瘦素和OPG的表达,起到抗炎、维持骨-肌稳态,改善骨骼肌肉质量与功能的作用.单用左归丸和单用电针也可以改善肌少症模型小鼠肌力和骨骼肌肉形态,但对骨微结构和相关内分泌因子无显著改善作用,推测可能因单一治疗方案无法同时起到调节全身相关因子与激活局部神经肌肉的作用,最终无法协同促进肌骨合成代谢导致干预作用弱于针药联合方案.