黄蒲通窍胶囊对Wilson病模型大鼠认知功能影响的作用机制OA

背景:Wilson病不仅影响肝脏功能,还可通过铜积累引发大脑中神经元的氧化损伤。研究发现,葡萄糖调节蛋白78/肌醇需求酶1α/肿瘤坏死因子受体相关因子2/c-Jun氨基末端激酶信号通路在Wilson病的神经病理进程中发挥关键作用,黄蒲通窍胶囊可通过清除氧自由基、抑制神经炎症、调节内质网应激相关通路,从而减轻铜负荷所致神经元损伤,改善学习记忆功能。目的:进一步验证黄蒲通窍胶囊对Wilson病模型大鼠认知功能的影响并探讨其作用机制。方法:将40只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、黄蒲通窍胶囊组和阳性对照组,每组10只。后3组大鼠通过硫酸铜负荷饮食法建立Wilson病模型。正常组及模型组给予生理盐水灌胃,黄蒲通窍胶囊组给予1.41 g/kg黄蒲通窍胶囊水煎剂灌胃,阳性对照组给予0.09 g/kg青霉胺药液灌胃,连续给药28 d。给药结束后,检测大鼠24 h尿铜水平;Morris水迷宫实验评估大鼠学习记忆功能;苏木精-伊红染色观察海马组织神经结构完整性;TUNEL染色观察海马组织凋亡神经元数量;ELISA法检测海马组织超氧化物歧化酶、丙二醛水平;蛋白免疫印迹法检测海马组织内质网应激相关葡萄糖调节蛋白78/肌醇需求酶1α/肿瘤坏死因子受体相关因子2/c-Jun氨基末端激酶信号通路蛋白表达。结果与结论:①与正常组相比,模型组大鼠24 h尿铜水平升高(P<0.05);与模型组相比,黄蒲通窍胶囊组和阳性对照组大鼠24 h尿铜水平进一步升高(P<0.05)。②与正常组相比,模型组大鼠逃逸潜伏期增长,穿越原始平台次数降低(P<0.05);与模型组相比,黄蒲通窍胶囊组、阳性对照组大鼠逃逸潜伏期缩短,穿越原始平台次数增加(P<0.05)。③与正常组相比,模型组大鼠海马组织出现神经结构破坏、细胞排列紊乱,并伴有TUNEL阳性凋亡神经元数量的显著增加;与模型组相比,黄蒲通窍胶囊组与阳性对照组海马组织神经结构完整性得到明显改善,细胞排列趋于整齐,TUNEL阳性凋亡神经元数量也显著减少。④与正常组相比,模型组海马组织葡萄糖调节蛋白78、肌醇需求酶1α、肿瘤坏死因子受体相关因子2、磷酸化c-Jun氨基末端激酶、caspase-12、Bax蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达下降(P<0.05);与模型组相比,黄蒲通窍胶囊组和阳性对照组大鼠上述指标呈现相反的变化(P<0.05)。⑤结果证实,黄蒲通窍胶囊能够改善Wilson病模型大鼠空间学习记忆能力,减轻海马组织神经元损伤,发挥神经保护作用,其作用机制可能与其抑制葡萄糖调节蛋白78/肌醇需求酶1α/肿瘤坏死因子受体相关因子2/c-Jun氨基末端激酶信号通路、进而减轻内质网应激有关。