班氏促卵助孕汤改善卵巢玻璃化冷冻氧化应激损伤OA

背景:玻璃化冷冻导致卵巢组织发生冷冻损伤,而班氏促卵助孕汤对玻璃化冷冻卵巢组织的保护作用及分子机制亟待完善。目的:探讨班氏促卵助孕汤对小鼠卵巢组织玻璃化冷冻的影响和分子机制。方法:①玻璃化冷冻前实验:取60只6-8周龄雌性昆明小鼠,随机分为对照Ⅰ组、模型Ⅰ组和班氏促卵助孕汤低、中、高剂量组,连续给药21 d后取出卵巢组织,对照Ⅰ组为新鲜卵巢,其余各组卵巢玻璃化冷冻7 d。②玻璃化冷冻后实验:60只6-8周龄雌性昆明小鼠取出卵巢组织,对照Ⅱ组为新鲜卵巢,其余为玻璃化冷冻7 d后卵巢,随机分为模型Ⅱ组、含药血清低、中、高剂量组,分别于体积分数15%空白大鼠血清、不同剂量班氏促卵助孕汤含药血清中37℃体外培养1 h。苏木精-伊红染色观察卵巢形态,TUNEL法检测卵巢细胞凋亡,比色法检测亚铁离子、谷胱甘肽、丙二醛、谷胱甘肽过氧化酶4含量,RT-qPCR和Western blot检测溶质载体家族7成员11、肿瘤抑制蛋白p53、谷胱甘肽过氧化酶4的mRNA及蛋白表达水平。结果与结论:①与对照Ⅰ、Ⅱ组相比,模型Ⅰ、Ⅱ组卵巢颗粒细胞排列紊乱且部分缺失,TUNEL阳性细胞率、亚铁离子含量、丙二醛含量、肿瘤抑制蛋白p53 mRNA及蛋白表达水平显著升高,谷胱甘肽含量、谷胱甘肽过氧化酶4含量与溶质载体家族7成员11、谷胱甘肽过氧化酶4 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。②与模型Ⅰ、Ⅱ组相比,班氏促卵助孕汤及其含药血清能减少卵巢组织闭锁卵泡数量,显著降低TUNEL阳性细胞率、亚铁离子含量、丙二醛含量、肿瘤抑制蛋白p53 mRNA及蛋白表达水平,显著提高谷胱甘肽含量、谷胱甘肽过氧化酶4含量与溶质载体家族7成员11、谷胱甘肽过氧化酶4 mRNA及蛋白表达水平(P<0.05)。因此,班氏促卵助孕汤及其含药血清可改善玻璃化冷冻小鼠卵巢组织及卵泡的形态结构,抑制卵巢组织细胞凋亡及铁死亡水平,从而改善卵巢组织冷冻损伤,其机制可能与抑制肿瘤抑制蛋白p53/溶质载体家族7成员11/谷胱甘肽过氧化酶4信号通路的异常激活有关。