PINK 1维持猪肌内脂肪细胞的线粒体呼吸功能与TCA代谢流稳定OA

本研究旨在探讨线粒体质量控制关键因子PINK 1在猪肌内脂肪细胞能量代谢调控中的作用及其对TCA循环代谢流的影响。以体外分化的猪肌内脂肪细胞为研究对象,采用短发夹RNA介导的基因沉默技术敲低PINK 1表达;利用Seahorse XF细胞能量代谢分析仪检测细胞线粒体呼吸和糖酵解功能;结合[U-^(13)C]葡萄糖同位素示踪与液相色谱-质谱联用技术,分析葡萄糖衍生碳进入TCA循环的代谢流变化;并通过外源补加苹果酸或琥珀酸,评估关键TCA中间代谢物对能量代谢障碍的补救作用。结果显示:(1)PINK 1敲低显著降低猪肌内脂肪细胞的基础呼吸和最大呼吸水平(P<0.001),提示线粒体呼吸功能受损;(2)^(13)C-葡萄糖示踪结果表明,PINK 1敲低显著降低TCA循环中琥珀酸、延胡索酸和苹果酸等关键代谢物的^(13)C标记比例(P<0.05),表明葡萄糖来源碳骨架进入TCA循环的能力减弱;(3)外源补加苹果酸或琥珀酸可提高PINK 1敲低细胞的氧消耗速率和糖酵解能力(P<0.05),在一定程度上恢复其整体能量代谢状态。综上所述,PINK 1在维持猪肌内脂肪细胞线粒体呼吸功能和TCA循环代谢流稳定中发挥重要作用,其缺失可导致细胞能量代谢障碍,而补充关键TCA中间代谢物能够部分逆转上述代谢异常。