安神固元汤联合骨髓间充质干细胞对自身免疫性卵巢早衰小鼠模型免疫调节和归巢作用的实验研究OA

目的 探讨安神固元汤联合骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stromal cells,BMSCs)对自身免疫性卵巢早衰小鼠模型的治疗效果及其治疗调节机制。方法 50只雌性KM小鼠,随机选取10只小鼠颈椎脱位安乐死,从骨髓中分离并培养BMSCs。剩余40只小鼠随机分为四组:对照组、模型组、BMSCs组和安神固元汤组,每组10只。对照组只注射生理盐水,模型组、BMSCs组和安神固元汤组则使用透明带糖蛋白3诱导自身免疫性卵巢早衰。造模成功后,BMSCs组直接注射BMSCs,安神固元汤组注射BMSCs后再灌胃安神固元汤15天,对照组及模型组小鼠灌胃等量生理盐水15天。实验末次给药后取材,收集小鼠眼球血、下丘脑以及卵巢组织。采用酶联吸附法检测抗卵巢抗体(anti ovary antibody,AOAB)、β-内啡肽(β-endorphin,β-EP)和细胞免疫相关细胞因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)。采用Transwell试验评估BMSCs的迁移能力,RT-qPCR和蛋白质印迹法检测C-X-C趋化因子受体4型(C-X-C motif chemokine receptor 4,CXCR4)的mRNA和蛋白表达。结果 与对照组相比,模型组的AOAB、TNF-α和IFN-γ均明显升高(P<0.01)。与模型组相比,BMSCs组和安神固元汤组的AOAB(P<0.05,P<0.01)、TNF-α(P>0.05,P<0.05)和IFN-γ(P<0.01,P<0.01)均下降。与对照组相比,模型组的β-EP明显降低(P<0.05)。与模型组相比,BMSCs组和安神固元汤组的β-EP升高(P<0.05)。与BMSCs组相比,安神固元汤组的BMSCs迁移、CXCR4 mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.01,P<0.01,P<0.05)。结论 安神固元汤联合BMSCs结合可能通过激活CXCR4通路,调节AOAB、β-EP 、TNF-α、IFN-γ来促进骨髓间充质干细胞归巢,干预小鼠模型的自身免疫性卵巢早衰。