基于代谢组学联合分析的青附蠲痹汤调控精氨酸代谢治疗类风湿关节炎病证的机制研究OA

目的 基于代谢组学与网络药理学联合分析,探讨青附蠲痹汤(QFJBT)治疗佐剂性关节炎(AIA)风寒湿痹证大鼠的作用机制,并重点验证其对精氨酸代谢通路的调控作用。方法 将48只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白对照组(8只)与造模组(40只),前者注射等体积生理盐水,后者用于建立AIA风寒湿痹证大鼠模型。造模结束后次日,将造模成功的大鼠随机均分为模型组、甲氨蝶呤(MTX)组及QFJBT低、中、高剂量组,每组8只。给药干预期间,空白对照组与模型组每日灌胃等体积生理盐水,1次/天;QFJBT低、中、高剂量组分别按4.59、9.18、18.36 g/kg剂量灌胃给药,1次/d;MTX组按1 mg/kg剂量灌胃甲氨蝶呤,每3天1次。各组均连续干预42 d,采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用仪非靶向代谢组学技术分析大鼠血浆代谢谱,通过多元统计分析筛选差异代谢物及关键信号通路;结合网络药理学筛选交集靶点,并利用Metscape构建“化合物-反应-酶-基因”通路,对核心通路进行整合分析;采用Western blot对关键靶点进行验证。结果 QFJBT可显著改善AIA大鼠异常代谢状态,精氨酸生物合成被鉴定为关键代谢途径。整合分析提示,精氨酸代谢通路(涵盖精氨酸的合成、分解及功能调控)可能是QFJBT发挥作用的核心代谢基础。Western blot结果显示,QFJBT可下调精氨酸酶1/2(Arginase 1/2)(P<0.001)和诱导型一氧化氮合酶(i NOS)表达水平(P<0.05),并促进精氨基琥珀酸合成酶1(ASS1)表达恢复(P<0.05);同时可抑制mTOR(P<0.05)及NF-κB信号通路的过度活化(P<0.001)。结论 QFJBT可能通过协同抑制mTOR/NF-κB信号轴,调控精氨酸代谢通路,从代谢、免疫、炎症及氧化应激等多个层面发挥综合调节作用。