癫痫患儿血浆中拉莫三嗪、左乙拉西坦和吡仑帕奈浓度测定方法的建立及应用OA

目的建立同时测定癫痫患儿血浆中拉莫三嗪(LTG)、左乙拉西坦(LEV)和吡仑帕奈(PER)浓度的方法并应用于临床。方法血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,以PER-D5为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法检测。色谱柱为ACQUITY UPLC HSS T3 C18,流动相为含0.1%甲酸的5 mmol/L乙酸铵溶液-乙腈(梯度洗脱),流速为0.3 mL/min,柱温为40℃,进样量为5μL,分析时间为5 min;采用电喷雾离子源,以多反应监测方式进行正离子扫描,用于定量分析的离子对分别为m/z255.9→144.9(LTG)、m/z 171.1→126.1(LEV)、m/z 350.1→219.0(PER)、m/z 354.9→220.2(内标)。采用上述UPLC-MS/MS法测定14例联合用药癫痫患儿血浆中上述药物的稳态谷浓度。结果LTG、LEV、PER检测质量浓度的线性范围分别为0.15~24μg/mL(R2>0.993)、0.3125~50μg/mL(R2>0.997)、6.25~1000 ng/mL(R2>0.995),定量下限分别为0.15μg/mL、0.3125μg/mL、6.25ng/mL;3种药物日内、日间精密度试验的RSD均不高于9.83%,准确度(相对误差)为-9.33%~13.72%(n=6或n=18);平均提取回收率为86.4%~97.9%,平均基质效应为86.9%~110.0%(n=6);稳定性试验的相对误差绝对值均低于15%。14例患儿体内LTG、LEV、PER的稳态谷浓度分别为(5.64±4.03)μg/mL、(10.67±8.78)μg/mL、(450.20±251.27)ng/mL,谷浓度达标率分别为71.4%、37.5%、84.6%。结论所建UPLC-MS/MS法专属性强、检测速度快,可用于联合用药癫痫患儿的血药浓度监测。