温中健脾法对早期非酒精性脂肪性肝炎模型大鼠细胞自噬的影响OA

目的探讨温中健脾法代表方理中汤对早期非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)大鼠肝细胞自噬的影响。方法80只健康SPF级SD大鼠,雌雄各半,采用数字表法随机分为12周正常组、16周正常组、早期NASH模型组、西药(维生素E软胶囊)对照组、理中汤低剂量组、理中汤中剂量组、理中汤高剂量组和理中汤中剂量+抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)组,每组10只;采用高脂饲料(2%胆固醇+10%猪油+88%标准饲料)喂养构建早期NASH大鼠模型,造模成功后分别予相应药物连续干预4周;全自动生化分析仪检测大鼠血清血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、空腹血糖测定(fasting blood glucose,FPG)及空腹胰岛素测定(fasting insulin,FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),HE染色观察大鼠肝脏组织的病理学改变并进行评分,Western blot法检测大鼠肝脏组织自噬相关蛋白Beclin1、IC3及P62的表达水平。结果1)与16周正常组比,模型组大鼠血清ALT、AST、TG、TC、LDL-C、FINS、FPG和HOMA-IR明显升高(P<0.01),肝组织小叶结构紊乱、大量脂肪空泡形成及炎性细胞浸润,NAS评分明显升高(P<0.01),自噬相关蛋白Beclin1、LC3表达水平明显下降而P62水平升高(P<0.01);2)与模型组、西药对照组比,理中汤低、中、高剂量各组均可明显降低大鼠血清ALT、AST、TG、TC、LDL-C、FINS、FPG和HOMA-IR(P<0.05),改善肝组织小叶结构紊乱、减少脂肪空泡及减轻炎症损伤,上调Beclin1、LC3蛋白表达和下调P62蛋白表达(P<0.01),其治疗效果具有显著的剂量依赖性;3)与中剂量中药组相比,中剂量中药+抑制剂组大鼠血清ALT、AST、TG、TC、LDL-C、FINS、FPG和HOMA-IR显著回升(P<0.01),肝组织Beclin1、LC3蛋白表达水平明显下降而P62水平明显升高(P<0.01)。结论温中健脾法治疗早期NASH的作用机制可能与其激活肝细胞自噬、改善炎症损伤有关。