ZFX通过PI3K/AKT通路调控Nectin-4表达促进食管鳞状细胞癌进展OA
ZFX promotes esophageal squamous cell carcinoma progression by regulating Nectin-4 expression through the PI3K/AKT pathway
目的:探讨X连锁锌指蛋白(ZFX)通过Nectin-4表达影响食管鳞状细胞癌(ESCC)进展的分子机制及其对PI3K/AKT信号通路的激活作用.方法:收集2022年8月至2023年7月在南充市中心医院手术切除的30对ESCC组织及癌旁组织标本.采用人食管上皮细胞HET-1A及ESCC细胞KYSE-30、KYSE-150、KYSE-410、KYSE-510和TE-1.基于2018年至2019年收集的6例ESCC配对标本转录组测序数据筛选Nectin-4,通过TIMER2.0数据库、RT-qPCR和WB法、免疫组织化学(IHC)检测ESCC组织及细胞中Nectin-4的表达水平.采用shRNA技术在KYSE-410和KYSE-510细胞中敲低Nectin-4,通过CCK-8、克隆形成、划痕愈合及Transwell实验检测敲低Nectin-4对细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,采用WB法检测敲低Nectin-4对细胞PI3K/AKT通路及EMT相关蛋白表达水平的影响.通过生物信息学预测并结合双萤光素酶报告基因实验,鉴定并验证ZFX作为Nectin-4的上游转录调控因子.结果:综合分析显示,ESCC组织及细胞系中Nectin-4表达显著高于癌旁组织及HET-1A细胞(均P<0.01).功能研究表明,敲低Nectin-4显著抑制KYSE-410和KYSE-510细胞的增殖活性、克隆形成能力,以及迁移和侵袭能力(均P<0.01).机制方面,敲低Nectin-4时细胞中E-cadherin表达上调、N-cadherin下调(均P<0.01),并抑制PI3K/AKT通路相关蛋白的磷酸化水平(P<0.01).结论:ZFX通过上调Nectin-4表达激活PI3K/AKT信号通路促进ESCC进展,为ESCC的治疗提供了潜在的新靶点.
Objective:To investigate the molecular mechanism by which X-linked zinc finger protein(ZFX)influenced the progression of esophageal squamous cell carcinoma(ESCC)through Nectin-4 expression and its role in activating the PI3K/AKT signaling pathway.Methods:Thirty pairs of ESCC tissue and adjacent tissue specimens surgically resected at Nanchong Central Hospital between August 2022 and July 2023 were collected.Human esophageal epithelial cells(HET-1A)and ESCC cell lines(KYSE-30,KYSE-150,KYSE-410,KYSE-510,and TE-1)were used.Nectin-4 was selected based on transcriptome sequencing data from 6 paired ESCC specimens collected between 2018 and 2019.Expression levels of Nectin-4 in ESCC tissues and cells were detected using the TIMER 2.0 database,RT-qPCR,Western blotting(WB),and immunohistochemistry(IHC).Nectin-4 was knocked down in KYSE-410 and KYSE-510 cells using shRNA technology.The effects of Nectin-4 knockdown on cell proliferation,migration,and invasion abilities were detected via CCK-8 assay,colony formation assay,scratch healing assay,and Transwell assay.WB analysis was performed to examine changes in PI3K/AKT pathway-related proteins and EMT-related proteins following Nectin-4 knockdown.Bioinformatics prediction combined with dual luciferase reporter assay identified and validated ZFX as an upstream transcriptional regulator of Nectin-4.Results:Comprehensive analysis revealed significantly higher Nectin-4 expression in ESCC tissues and cell lines compared with that in adjacent non-cancerous tissues and HET-1A cells(all P<0.01).Functional studies revealed that Nectin-4 knockdown significantly inhibited proliferation activity,colony formation capacity,migration,and invasion capabilities in KYSE-410 and KYSE-510 cells(all P<0.01).Mechanistically,knocking down Nectin-4 upregulated E-cadherin expression,downregulated N-cadherin expression in cells(both P<0.01),and inhibited the phosphorylation of PI3K/AKT pathway-related proteins(P<0.01).Conclusion:ZFX promotes ESCC progression by upregulating Nectin-4 and activating the PI3K/AKT pathway,identifying potential therapeutic targets for ESCC treatment.
龙元凤;别俊;宋桂芹;刘康;杨燕;卞宇航;邓钰滨;陈巧玲;杨航;张若兰;赵全能;杨蜜
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医药卫生
食管鳞状细胞癌Nectin-4X连锁锌指蛋白上皮-间质转化PI3K/AKT信号通路
esophageal squamous cell carcinoma(ESCC)Nectin-4X-linked zinc finger protein(ZFX)epithelial-mesenchymal transition(EMT)PI3K/AKT signaling pathway
《中国肿瘤生物治疗杂志》 2026 (4)
408-417,10
国家自然科学基金(82203851)四川省科学技术厅项目(2024NSFSC1973,2023YFS0473)四川省医学会医学科研项目(S2024009)南充市市校合作项目(22SXQT0336,23JCYJPT0027,22SXQT0340,22SXQT0087,22SXQT0096)川北医学院科研项目(CBY24-KP03,CBY22-QDA01,CBY23-ZDA11)四川省科技厅苗子工程(MZGC20240072,MZGC20240071)
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