鸭坦布苏病毒E蛋白和NS1蛋白亚单位疫苗免疫效果的研究OA

制备鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)E蛋白和NS1蛋白亚单位疫苗并评价其免疫效果。将DTMUV(JZ分离株)结构蛋白E基因(仅包含DomainⅠ、Ⅱ和Ⅲ区域)和非结构蛋白NS1基因分别克隆到pET-28a(+)原核表达载体,表达质粒分别命名为pET-28a-E和pET-28a-NS1。应用镍柱亲和方法纯化表达后的蛋白,经BCA定量后,将纯化的蛋白稀释为25μg/mL。用佐剂乳化制备成亚单位疫苗,并通过雏鸭免疫接种和病毒感染试验来评价疫苗的免疫效果。E+NS1蛋白免疫组抗体滴度最高,其次是E蛋白免疫组,NS1蛋白免疫组和灭活疫苗免疫组抗体滴度最低。病毒感染免疫后的试验鸭,疫苗免疫组雏鸭均全部存活,没有明显的病态表现,内脏器官均无出现明显的病理变化。以鸭坦布苏病毒E蛋白和NS1蛋白制备亚单位疫苗均具有较好的免疫保护效果,E蛋白和NS1蛋白混合免疫策略可以引起雏鸭体内产生更高的抗体水平,本研究为DTMUV亚单位疫苗候选靶区域提供了更多的选择,也为今后DTMUV疫苗的进一步推广和应用提供科学依据。