猪圆环病毒3型荧光定量PCR检测方法的建立及应用OA

猪圆环病毒3型(Porcine circovirus 3,PCV3)在全球范围内广泛存在,在临床上能引起猪皮炎和肾病综合征等症状,给养猪业带来巨大的经济损失。为掌握PCV3的流行情况,为PCV3防控提供理论依据,建立检测PCV3荧光定量PCR方法并开展河北地区分子流行病学调查。根据PCV3的开放阅读框2(open reading frames,ORF2)保守基因序列设计特异性引物,建立检测PCV3的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法,对其特异性、敏感性和重复性进行评估,应用建立的方法对实验室保存的河北地区临床样品进行回顾性流行病学调查。结果显示:质粒标准品在5.96×10^(8)~5.96×10^(2) copies/μL浓度内线性关系良好,只能特异性检测PCV3,最低检测限为5.96×10^(1) copies/μL;批内和批间变异系数分别小于1%和2%;检测2015—2020年河北省部分地区的临床样品,PCV3的总阳性率为81.22%,说明PCV3在河北地区感染很普遍。本研究建立了一种检测PCV3的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法,应用建立的方法掌握了河北地区PCV3的流行情况,为后续对病毒的深入研究奠定了基础。