牛传染性鼻气管炎实时荧光RAA检测方法的建立与应用OA
为简便、高效、快速检测传染性牛气管炎病毒(Infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV),本试验根据IBRV gB基因片段保守区设计引物及探针,构建IBRV重组质粒标准品,各条件优化后建立IBRV重组酶介导核酸等温扩增荧光法(recombinase aided amplification,RAA)检测技术。结果显示:该方法在39℃恒温条件下20 min即可完成检测;建立的方法与牛呼吸道合胞体病毒(Bovine respiratory syncytial virus,BRSV)、牛副流感病毒3型(Bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)、牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)、冠状病毒(Bovine coronavirus,BCoV)核酸均无交叉反应,特异性良好;IBRV的重组质粒标准品检出最低拷贝限至1×10^(2)拷贝/μL,灵敏度较高;批间批内重复性试验证明该方法具有较好的重复性;所建立的方法与常规PCR法分别对50份牛临床样本进行检测,阳性率均为6%(3/50)。本试验建立的IBRV实时荧光RAA检测方法简便、高效、特异、灵敏,便于IBRV的临床检测与流行病学的研究。
侯冠欣;孙欣艺;安瑞;张春晓;王利丽;李红;朱思萍;史秋梅;张志强
河北科技师范学院河北省预防兽医重点实验室,秦皇岛066004河北科技师范学院河北省预防兽医重点实验室,秦皇岛066004河北科技师范学院河北省预防兽医重点实验室,秦皇岛066004河北科技师范学院河北省预防兽医重点实验室,秦皇岛066004河北科技师范学院河北省预防兽医重点实验室,秦皇岛066004河北科技师范学院河北省预防兽医重点实验室,秦皇岛066004河北科技师范学院河北省预防兽医重点实验室,秦皇岛066004河北科技师范学院河北省预防兽医重点实验室,秦皇岛066004河北科技师范学院河北省预防兽医重点实验室,秦皇岛066004
农业科技
牛传染性牛鼻气管炎病毒gB基因重组酶介导核酸等温扩增荧光法检测方法
《中国动物传染病学报》 2026 (1)
P.92-98,7
中央引导地方科技发展资金项目(236Z6604G)河北省现代农业产业技术体系肉牛产业创新团队疫病防控与减抗岗位(2HBCT2023190201)河北省高层次人才资助项目(C20231014)河北科技师范学院高校基本科研业务费专项项目(2023JK14)承德国家可持续发展议程创新示范区建设科技专项项目(202302F040)。
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