稳定表达猪流行性腹泻病毒S蛋白Flp-In^(TM) CHO细胞系的构建OA

猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是引起猪病毒性腹泻的重要病原,在世界范围内广泛流行,给全球养猪业带来了巨大的经济损失。PEDV S蛋白含丰富的抗原表位,能够诱导机体产生针对PEDV的中和抗体,被认为是研制PEDV亚单位疫苗的主要靶标抗原。构建稳定表达PEDV S蛋白的细胞系,可为抗PEDV基因工程疫苗及S蛋白功能研究奠定基础。本研究构建了包含S蛋白全长基因的质粒pCDNA5/FRT-S和包含S蛋白胞外结构域的质粒(去除跨膜结构域和胞内区)pCDNA5/FRT-S(-Tm),把两种质粒分别转染CHO细胞,经抗性筛选获得了稳定表达目标蛋白的Flp-In^(TM) CHO细胞系。IFA结果显示,两种重组细胞系传代至第10代仍能稳定表达目的蛋白。这些细胞系的建立为研制抗PEDV新型亚单位疫苗奠定了良好的基础。