超高效液相色谱串联质谱法测定呋塞米原料药中N-亚硝基呋塞米含量OA

目的建立测定呋塞米原料药中N-亚硝基呋塞米含量的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)法。方法色谱柱为Waters XBridge C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,3.5μm),流动相为0.01%甲酸水溶液(含0.005 mol/L甲酸铵)-乙腈(梯度洗脱),流速为0.6 mL/min,柱温为30℃,进样量为10μL;采用电喷雾电离负离子(ESI-)、多反应监测(MRM)模式进行定量分析。离子源温度为500℃,雾化气为50 psi,毛细管电压为-4500 V,电势能为-30 V,质荷比(m/z)为357.8→283.9,碰撞能为-13 V,采集时间为8.5~10.0 min。结果N-亚硝基呋塞米质量浓度在0.38~2.86 ng/mL范围内与内标峰面积比值线性关系良好(r=0.9996,n=7);定量限和检测限分别为0.38,0.19 ng/mL;中间精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于6%。平均加样回收率为97.32%,RSD为3.86%(n=9)。6批样品中均检出N-亚硝基呋塞米,含量分别为0.55,0.54,0.62,0.58,0.41,0.58μg/L。结论该方法操作简便、专属性强、灵敏度与准确度高,适用于呋塞米原料药中N-亚硝基呋塞米含量测定,可为呋塞米原料药及相关制剂中基因毒性杂质含量控制提供参考。