Plackett-Burman联合响应面优化超声辅助酶解制备花生肽工艺及其抗氧化活性研究OA

本研究通过优化超声辅助蛋白酶分步酶解花生分离蛋白制备花生肽工艺和评价花生肽抗氧化活性,获得适合开发肽锌螯合物的花生肽。采用单因素试验、最陡爬坡试验和Plackett-Burman试验设计法,筛选出具有显著效应的4个因素(底物浓度、加酶量Ⅰ、温度、加酶量Ⅱ),再利用响应面Box-Behnken设计进一步优化花生肽的制备工艺。结果显示,在底物浓度为2.91%、加酶量Ⅰ为0.83%、温度为54℃、加酶量Ⅰ为0.38%的最优条件下,花生肽氮含量和锌螯合率理论值分别为23.07 mg/mL和38.73%,验证试验值分别为(23.51±0.36)mg/mL和(38.25±0.24)%,差值都在2%以内,说明Plackett-Burman联合响应面可以实现超声辅助蛋白酶酶解制备具有较高锌螯合活性的花生肽。此外,花生肽的钼还原力、羟自由基清除能力和铁离子螯合力的IC_(50)值均小于5.00 mg/mL,DPPH自由基清除能力、铜离子螯合力和铁还原力的IC_(50)值均小于8.50 mg/mL,超氧阴离子自由基清除能力和脂质过氧化抑制能力的IC_(50)值分别为26.09 mg/mL和31.57 mg/mL。因此,本研究为开发具有抗氧化活性的花生肽锌螯合物提供了理论基础。