miR-6509-3p调控EMT进程促进肝癌细胞迁移和侵袭OA

目的探讨miR-6509-3p是否通过上皮细胞-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)影响肝癌细胞侵袭和迁移。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测2024年1月至2025年1月在联勤保障部队第988医院普通外科行肝癌切除术的92例患者肝癌组织和癌旁组织中miR-6509-3p表达情况,分析临床病理特征与miR-6509-3p表达水平的关系。同时,检测miR-6509-3p在多株肝癌细胞的表达情况。在MHCC97-H中干扰miR-6509-3p表达,而HepG2过表达miR-6509-3p,设置相应的对照组。细胞毒实验(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)和EdU检测各组细胞增殖能力;细胞划痕和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;免疫印迹试验(Western blot)检测各组细胞中E-cadherin、N-cadherin和snail蛋白表达情况。生物信息学预测miR-6509-3p与SLCO1B3结合。qRT-PCR检测92例肝癌组织中SLCO1B3 mRNA的表达,并分析其与miR-6509-3p的相关性。双荧光素酶报告实验和RNA免疫沉淀(RNA immunoprecipitation,RIP)实验进一步验证二者的结合。在回复实验中设置SLCO1B3干扰组,观察对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭能力影响和EMT相关蛋白表达的变化。结果肝癌组织中miR-6509-3p表达明显高于癌旁组织(P<0.001),且与肿瘤大小、分化程度、微血管癌栓方面均显著相关(P<0.05)。过表达miR-6509-3p可促进肝癌细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.001),伴随E-cadherin蛋白表达降低(P<0.001),N-cadherin和snail蛋白表达增加(P<0.01),干扰miR-6509-3p后产生了相反的作用效果(P<0.01)。在肝癌组织中miR-6509-3p与SLCO1B3 mRNA表达呈显著负相关(P<0.001)。miR-6509-3p靶向结合SLCO1B3。干扰SLCO1B3可以逆转miR-6509-3p inhibitor对肝癌细胞增殖,侵袭、迁移和EMT相关蛋白表达的影响(P<0.01)。结论miR-6509-3p在肝癌细胞和组织中高表达,其可促进肝癌细胞增殖,侵袭和迁移,促进EMT过程,可能通过miR-6509-3p/SLCO1B3轴发挥作用。