抗体药物中高风险聚山梨酯降解酶残留的质谱分析OA
抗体药物中微量的宿主细胞蛋白质(HCP)残留会导致其关键辅料聚山梨酯(吐温)降解,进而产生不溶性微粒,影响药品的有效性和安全性。本研究建立了一种定量分析HCP残留中微量聚山梨酯降解酶的质谱方法。首先使用液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(LC-QTOF MS)系统的迭代采集方式,对Protein A亲和层析纯化液中高风险HCP进行非靶向筛查,得到聚山梨酯降解酶的蛋白质和肽段鉴定列表。随后,使用液相色谱-三重四极杆质谱(LC-QQQ MS)靶向定量技术,建立基于特征肽段的多重反应监测定量分析方法,对溶酶体磷脂酶A2、磷脂酶B样2、脂蛋白脂肪酶及溶酶体酸性脂肪酶等4种聚山梨酯降解酶进行检测。同时,优化样品处理流程,并对方法进行验证。结果表明,本方法的定量限和检测限分别为0.5、0.1μg/g。最后,使用该方法对纯化工艺过程样品、原液和成品中的4种聚山梨酯降解酶进行定量分析。该方法快速、灵敏,适用于抗体药物中高风险聚山梨酯降解酶的鉴别和定量分析。
俞小娟;王飞宇;张佳龄;王兰;于传飞
中国食品药品检定研究院,药品监管科学全国重点实验室,国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室,北京102629中国食品药品检定研究院,药品监管科学全国重点实验室,国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室,北京102629 沈阳药科大学制药工程学院,辽宁本溪117004中国食品药品检定研究院,药品监管科学全国重点实验室,国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室,北京102629中国食品药品检定研究院,药品监管科学全国重点实验室,国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室,北京102629中国食品药品检定研究院,药品监管科学全国重点实验室,国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室,北京102629
化学化工
质谱宿主细胞蛋白质(HCP)聚山梨酯降解不溶性微粒
《质谱学报》 2026 (2)
P.250-260,I0004,12
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