续苓健骨方干预骨质疏松模型大鼠的免疫机制OA

背景:骨质疏松症不仅是一种代谢性疾病,也是一种炎症性疾病或自身免疫疾病,免疫细胞调节性T细胞、Th17细胞对破骨细胞分化、成熟具有相互拮抗作用,二者平衡的维持是保证正常骨代谢的基础。目的:探讨续苓健骨方对骨质疏松的免疫调节机制及其与调节性T细胞/Th17细胞平衡的关系。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组和药物组,每组8只,后两组大鼠制备双侧卵巢切除模型;假手术组操作方法相同,但不切除卵巢。造模4周后双能X射线骨密度仪检测各组大鼠骨密度评价造模是否成功。造模术后4周给药,续苓健骨方组以10 mL/kg续苓健骨方每日灌胃1次,连续灌胃16周;模型组和假手术组大鼠灌胃等量生理盐水。药物灌胃16周后取材,检测骨密度、血常规指标,苏木精-伊红染色观察骨组织形态,ELISA检测相关血清免疫因子水平,定量PCR及Western Blot检测骨保护素、核因子κB受体活化因子配体、维甲酸相关孤儿受体γT、叉头转录因子3的基因和蛋白表达,流式细胞仪检测调节性T细胞、Th17细胞数量。结果与结论:①给药16周后,与模型组相比,续苓健骨方组大鼠骨密度显著增加(P<0.05),血清免疫细胞因子白细胞介素10、转化生长因子β质量浓度增加但是无显著性差异,白细胞介素17和白细胞介素6质量浓度显著降低(P<0.05);②给药16周后,续苓健骨方组大鼠骨保护素与调节性T细胞标志基因叉头转录因子3的基因和蛋白表达较模型组显著上升(P<0.05),Th17细胞标志基因维甲酸相关孤儿受体γT的基因和蛋白表达显著下降(P<0.05),核因子κB受体活化因子配体蛋白表达显著下降(P<0.05),但基因表达有下降趋势但无显著性差异;③流式细胞仪结果显示续苓健骨方组的调节性T细胞数量显著增多(P<0.05),Th17细胞数量有减少但无统计学差异;④提示续苓健骨方治疗骨质疏松的免疫机制为通过增加调节性T细胞数量来影响调节性T细胞/Th17平衡,之后通过降低白细胞介素17和白细胞介素6分泌,促进叉头转录因子3上调、维甲酸相关孤儿受体γT下调,从而改变骨保护素/核因子κB受体活化因子配体比值,进而抑制破骨细胞的分化。