患者源性食管胃结合部腺癌类器官模型的构建与鉴定OA
背景:传统细胞培养模型在精准模拟肿瘤生物学特性方面存在较大局限,类器官技术凭借保留原发肿瘤关键生物学特性的优势,为深入探究食管胃结合部腺癌的发病机制以及开展精准诊疗相关研发工作提供技术支撑。目的:构建患者源性食管胃结合部腺癌类器官模型,评估与原发肿瘤生物学特征的一致性,为食管胃结合部腺癌的发病机制研究及精准诊疗提供标准化体外模型。方法:收集50例食管胃结合部腺癌患者手术切除标本进行组织分离、培养及类器官模型构建;采用荧光共定位染色分析类器官模型中的细胞活性;通过苏木精-伊红染色分析类器官模型与原发肿瘤组织的结构特征;运用过碘酸雪夫染色检测类器官模型中的黏液分泌表型;采用免疫组织化学染色评估类器官模型与原发肿瘤组织病理学的一致性;使用卡方检验及单因素逻辑回归分析类器官模型构建成功率与患者临床病理特征、组织特征的相关性。结果与结论:成功构建了患者源性食管胃结合部腺癌类器官模型培养体系,原代培养成功率为86.0%(43/50),类器官呈典型三维结构,自细胞团块逐步发育为腺腔样三维实性球体,经原代培养7-10 d后可稳定传代,连续传代多次未出现明显表型改变,且冻存复苏后类器官仍可稳定增殖;荧光共定位染色显示类器官模型在不同培养阶段均可保持较高活力;苏木精-伊红染色结果显示类器官模型与原发肿瘤组织均呈现异型腺体排列及高核质比特征;过碘酸雪夫染色同步呈现阳性黏液分泌;免疫组织化学染色显示类器官模型与原发肿瘤组织的Ki67、CEA、CK7、Cadherin17阳性表达率具有高度一致性。此外,卡方检验及逻辑回归分析结果显示,肿瘤组织低分化(P=0.02)、经新辅助化疗达到主要病理缓解(P=0.007)、肿瘤组织离体时间(P=0.006)及肿瘤质量(P=0.006)可显著影响患者源性食管胃结合部腺癌类器官模型构建的成功率。
高震东;张理;陈攀;尹希瑶;李佳怡;杨平娟;张敏;廖淑馨;石林林;高社干
河南科技大学基础医学与法医学院,河南省洛阳市471023 河南科技大学临床医学院,河南科技大学第一附属医院,河南省微生态与食管癌防治重点实验室,河南省洛阳市471003河南科技大学临床医学院,河南科技大学第一附属医院,河南省微生态与食管癌防治重点实验室,河南省洛阳市471003河南科技大学临床医学院,河南科技大学第一附属医院,河南省微生态与食管癌防治重点实验室,河南省洛阳市471003河南科技大学临床医学院,河南科技大学第一附属医院,河南省微生态与食管癌防治重点实验室,河南省洛阳市471003河南科技大学临床医学院,河南科技大学第一附属医院,河南省微生态与食管癌防治重点实验室,河南省洛阳市471003河南科技大学临床医学院,河南科技大学第一附属医院,河南省微生态与食管癌防治重点实验室,河南省洛阳市471003河南科技大学基础医学与法医学院,河南省洛阳市471023河南科技大学临床医学院,河南科技大学第一附属医院,河南省微生态与食管癌防治重点实验室,河南省洛阳市471003河南科技大学临床医学院,河南科技大学第一附属医院,河南省微生态与食管癌防治重点实验室,河南省洛阳市471003河南科技大学临床医学院,河南科技大学第一附属医院,河南省微生态与食管癌防治重点实验室,河南省洛阳市471003
医药卫生
食管胃结合部腺癌原代培养三维培养类器官模型构建细胞活力组织病理分析肿瘤模型
《中国组织工程研究》 2026 (34)
P.8970-8977,8
国家自然科学基金项目(82302966),项目负责人:石林林国家临床重点专科建设项目联合基金(ZLKFJJ20230401),项目负责人:石林林河南省临床医学科学家培养专项(HNCMS202438),项目负责人:石林林河南省医学科技攻关省部共建重点项目(LHGJ20230455),项目负责人:陈攀。
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