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骨髓间充质干细胞移植对自然衰老小鼠免疫功能的调节作用研究OA

Regulatory effects of bone marrow mesenchymal stem cell transplantation on immune function in naturally aged mice

中文摘要英文摘要

目的 探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)移植对自然衰老小鼠免疫功能的调节作用.方法 取幼龄 C57BL/6N 小鼠骨髓,分离培养 BM-MSCs,观察其贴壁生长形态,并通过成骨诱导茜素红染色及流式细胞术对细胞进行表征鉴定.将自然衰老小鼠随机分为对照组和 BM-MSCs 移植组,每组5 只.BM-MSCs 移植组经尾静脉注射 BM-MSCs 悬液,对照组注射等量生理盐水.部分 BM-MSCs 经绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记后用于体内归巢观察.治疗后采用 HE 染色观察脾脏组织病理形态学变化;采用 ELISA 检测脾脏组织中白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)和白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)表达水平;采用流式细胞术检测脾脏 CD3+CD4+T 细胞和 CD3+CD8+T 细胞比例.结果 原代培养的 BM-MSCs 呈贴壁生长,传代后细胞呈长梭形或多角形并融合成片;成骨诱导后可见茜素红阳性钙化结节;流式细胞术检测显示细胞表面标志物CD44 阳性、CD34 阴性、CD45 阴性,表明所分离培养细胞符合 BM-MSCs 表型特征.GFP 标记后 BM-MSCs 可见明显绿色荧光,且尾静脉输注后可归巢至脾脏组织.与对照组比较,BM-MSCs 移植组小鼠的脾脏组织红髓与白髓结构改善,脾小体边缘较完整,巨噬细胞数量减少;脾脏组织中IL-2表达水平升高,IL-10 表达水平降低;脾脏 CD3+CD4+T 细胞和 CD3+CD8+T 细胞比例均明显升高(P<0.05).结论 BM-MSCs 移植能够归巢至自然衰老小鼠脾脏,并通过改善脾脏组织结构、调节细胞因子表达及增加CD3+CD4+T 细胞和 CD3+CD8+T 细胞比例,增强机体免疫功能,提示其对免疫衰老具有一定干预作用.

Objective To investigate the regulatory effect of bone marrow mesenchymal stem cells(BM-MSCs)transplantation on immune function in naturally aged mice.Methods BM-MSCs were isolated and cultured from the bone marrow of young C57BL/6N mice.Cell morphology was observed,and the cells were characterized by alizarin red staining after osteogenic induction and flow cytometry.Naturally aged mice were randomly divided into a control group and a BM-MSCs transplantation group,with 5 mice in each group.The treatment group received BM-MSCs via tail vein injection,while the control group received an equal volume of normal saline.Some BM-MSCs were labeled with green fluorescent protein(GFP)for homing analysis in vivo.After treatment,histopathological changes in spleen tissue were observed by hematoxylin-eosin(HE)staining.The expression levels of interleukin-2(IL-2)and interleukin-10(IL-10)in spleen tissues were deter-mined by ELISA.The proportions of CD3+CD4+and CD3+CD8+T cells in spleen tissues were detected by flow cytometry.Results Primary BM-MSCs showed adherent growth.After passage,the cells exhibited spindle-shaped or polygonal morphology and grew in a confluent pattern.Alizarin red staining showed positive calcified nodules after osteogenic induction.Flow cytometry demonstrated that the cultured cells were positive for CD44 and negative for CD34 and CD45,consistent with the phenotypic characteristics of BM-MSCs.GFP-labeled BM-MSCs showed strong green fluorescence and were able to home to spleen tissue after tail vein transplantation.Compared with the control group,the BM-MSCs transplantation group showed improved splenic architecture with clearer red pulp and white pulp,more intact splenic corpuscles,and fewer macrophages.In addition,IL-2 expres-sion in spleen tissues increased,whereas IL-10 expression decreased.The proportions of CD3+CD4+and CD3+CD8+T cells also significantly increased in the BM-MSCs transplantation group(P<0.05).Conclusion BM-MSCs transplantation can home to the spleen of naturally aged mice and enhance immune function by impro-ving splenic histological structure,regulating cytokine expression,and increasing the proportions of CD3+CD4+and CD3+CD8+T cells,suggesting a potential intervention effect on immunosenescence.

胡平胜;程萍萍;曾刘浩南;邓红玉;彭名菁;杨晓煌;简炼;贺卓;左朝晖;胡武龙;谭诗梓;吴梦琦;郑金海;周侃;刘卓;陈芳;马铁祥

中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院 湖南省肿瘤医院放诊科,湖南省胰胆肠结合部肿瘤临床医学研究中心,肝癌转化医学联合研究中心,消化道肿瘤实验室,湖南 长沙 410013中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院 湖南省肿瘤医院放诊科,湖南省胰胆肠结合部肿瘤临床医学研究中心,肝癌转化医学联合研究中心,消化道肿瘤实验室,湖南 长沙 410013中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院 湖南省肿瘤医院放诊科,湖南省胰胆肠结合部肿瘤临床医学研究中心,肝癌转化医学联合研究中心,消化道肿瘤实验室,湖南 长沙 410013中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院 湖南省肿瘤医院放诊科,湖南省胰胆肠结合部肿瘤临床医学研究中心,肝癌转化医学联合研究中心,消化道肿瘤实验室,湖南 长沙 410013中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院 湖南省肿瘤医院放诊科,湖南省胰胆肠结合部肿瘤临床医学研究中心,肝癌转化医学联合研究中心,消化道肿瘤实验室,湖南 长沙 410013中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院 湖南省肿瘤医院放诊科,湖南省胰胆肠结合部肿瘤临床医学研究中心,肝癌转化医学联合研究中心,消化道肿瘤实验室,湖南 长沙 410013中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院 湖南省肿瘤医院放诊科,湖南省胰胆肠结合部肿瘤临床医学研究中心,肝癌转化医学联合研究中心,消化道肿瘤实验室,湖南 长沙 410013中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院 湖南省肿瘤医院放诊科,湖南省胰胆肠结合部肿瘤临床医学研究中心,肝癌转化医学联合研究中心,消化道肿瘤实验室,湖南 长沙 410013中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院 湖南省肿瘤医院放诊科,湖南省胰胆肠结合部肿瘤临床医学研究中心,肝癌转化医学联合研究中心,消化道肿瘤实验室,湖南 长沙 410013||湖南大学生命医学交叉研究院,湖南 长沙 410082||南华大学衡阳医学院湖南省肿瘤医院研究生协助培养基地,湖南 长沙 410013湖南大学生命医学交叉研究院,湖南 长沙 410082南华大学衡阳医学院湖南省肿瘤医院研究生协助培养基地,湖南 长沙 410013南华大学衡阳医学院湖南省肿瘤医院研究生协助培养基地,湖南 长沙 410013湖南大学生命医学交叉研究院,湖南 长沙 410082湖南中医药大学中西医结合学院,湖南 长沙 410208中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院 湖南省肿瘤医院放诊科,湖南省胰胆肠结合部肿瘤临床医学研究中心,肝癌转化医学联合研究中心,消化道肿瘤实验室,湖南 长沙 410013湖南大学附属医院 湘潭市中心医院,湖南 湘潭 411000湖南大学附属医院 湘潭市中心医院,湖南 湘潭 411000

干细胞移植骨髓间充质干细胞自然衰老小鼠免疫衰老免疫调节T淋巴细胞

stem celltransplantationbone-marrow mesenchymal stem cells(BM-MSCs)natural aging mouseimmunosenescenceimmune regulationT cells

《中国现代手术学杂志》 2026 (1)

1-9,9

国家自然基金2024年度面上项目(82470219)2025年度湖南省重点研发计划项目(2025JK2116)

10.16260/j.cnki.1009-2188.2026.01.001

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