桃红四物汤调控PI3K/Akt通路促进吻合血管存活OA

目的:基于网络药理学与分子对接技术探讨桃红四物汤调控吻合血管存活的分子机制,并通过动物实验验证其关键信号通路。方法:基于中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库筛选桃红四物汤活性成分及靶点,结合血管吻合相关靶点获取93个交集基因,构建PPI网络筛选28个核心靶点,通过京都基因与基因组百科全书(KEGG)/基因本体(GO)富集分析锁定PI3K/Akt为核心通路;通过分子对接明确β-谷甾醇、槲皮素、木犀草素与PI3K/Akt通路蛋白的结合能力;最后,建立大鼠尾部中动脉吻合模型,随机分为假手术组、空白组、桃红四物汤组及蒸馏水组(n=9),术后分别灌胃干预,于第2、8、15天苏木精-伊红(HE)染色检测血管内膜面积,蛋白质印迹(Western blotting)法检测PI3K/Akt通路及VEGF蛋白表达。结果:网络药理学预测桃红四物汤可能通过PI3K/Akt通路调控吻合血管存活,分子对接示β-谷甾醇、槲皮素、木犀草素与PI3K/Akt通路蛋白具有强结合能力;术后第1天,桃红四物汤组与蒸馏水组大鼠尾部血管充盈时间于术后第1天就达到峰值,并逐步于第6~7天恢复至正常水平,空白组与假手术组未进行血管吻合大鼠尾部血管充盈时间无明显差异;HE染色显示:干预第2天,桃红四物汤组血管内膜面积与其他组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Western Blotting结果显示,桃红四物汤组在术后第2天即显著上调VEGF、PI3K及Akt蛋白表达;至第8天,该组VEGF(P<0.05)、PI3K(P<0.05)及Akt(P<0.01)表达仍显著高于蒸馏水组;第15天时,桃红四物汤组PI3K(P<0.05)及Akt(P<0.01)表达仍显著高于蒸馏水组。结论:桃红四物汤可能通过促进PI3K/Akt信号轴相关蛋白表达,推动吻合血管存活。