知母皂苷元减轻氧糖剥夺/复糖复氧小鼠海马神经元氧化应激和铁死亡的机制研究OA

探讨知母皂苷元(sarsasapogenin,Sar)在脑缺血/再灌注损伤(cerebral ischemia/reperfusion injury,CI/R)的保护作用和潜在分子机制。利用氧糖剥夺/复糖复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)诱导的小鼠海马神经元HT22细胞作为CI/R离体细胞模型。将HT22细胞分为对照组(control group,Con)、OGD/R组、Sar低浓度组(2μmol/L)、Sar中浓度组(4μmol/L)、Sar高浓度组(8μmol/L)、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)抑制剂LY294002组(20μmol/L)及高浓度Sar+LY294002组(8μmol/L Sar+20μmol/L LY294002)。CCK-8法检测细胞增殖活性;试剂盒检测天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3活性(cysteinyl aspartate-specific protease-3,CASP3)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平;2,7-二氯荧光素二乙酸酯(2′,7′-dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)法检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;脂质过氧化荧光探针法检测脂质过氧化水平;比色法检测亚铁离子水平;Western blot检测蛋白表达。结果显示,Sar可增强OGD/R损伤后HT22细胞活性;与OGD/R组相比,Sar组ROS水平、脂质过氧化、亚铁离子、及MDA水平降低,而SOD活性、GSH、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)蛋白水平升高;此外,Sar处理后,磷酸化PI3K(p-PI3K)/PI3K比值及磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated-protein kinase B,p-AKT)/AKT比值升高;LY294002削弱了Sar对OGD/R诱导的氧化应激和铁死亡的减轻作用。总的来说,Sar通过激活PI3K-AKT信号通路减轻OGD/R诱导的海马神经元氧化应激和铁死亡。