基于LAMP-CRISPR/Cas12a技术快速检测转基因玉米DBN9501转化体特异性OA
Rapid Detection of Transgenic Maize DBN9501 Event-specificity Based on LAMP-CRISPR-Cas12a Technology
[目的]转化体特异性检测是转基因生物安全监管中识别转化体合法性的重要技术手段,目前转化体特异性检测以实验室检测为主,急需开发能够现场快速检测的方法,满足转基因生物安全监管需求.[方法]以抗虫耐除草剂转基因玉米DBN9501为材料,利用环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术结合CRISPR/Cas12a(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)技术(LAMP-CRISPR/Cas12a),辅助试纸条显示,开发转化体特异性快速检测方法.[结果]本方法具有检测特异性,检出限为20拷贝,转化体含量为0.1%,检测时间<60 min.[结论]LAMP-CRISPR/Cas技术能够实现快速检测转基因玉米DBN9501转化体特异性,该方法将为转基因生物安全监管快速检测技术研究提供重要技术支撑.
[Objective]The event specificity is a key focus of transgenic regulation.Currently,laboratory testing remains the primary method for detecting event specificity.Therefore,it is an urgent need to develop a method that can be quickly detected on-site,thus meeting the regulatory needs for genetically modified organisms.[Method]This study used insect-resistant and herbicide-tolerant transgenic maize DBN9501 as the material,and utilized loop-mediated isothermal amplification(LAMP)combined with CRISPR/Cas12a technology,assisted by a lateral flow test strip display,to develop a rapid detection method suitable for on-site event-specificity.[Result]This detection method has a detection specificity.The limit of detection is about 20 copies,that is,0.1%event content,time of detection<60 min.[Conclusion]The LAMP-CRISPR/Cas method enables the rapid detection of maize DBN9501 event-specificity,providing technical support in supervising the safety of genetically modified organisms in China.
王晶;刘卓艳;张晓磊;刘宝海;关海涛;温洪涛
黑龙江省农业科学院农产品质量安全研究所 农业农村部谷物及制品质量检验测试中心(哈尔滨)国家市场监督管理总局重点实验室(谷物及制品质量与安全),哈尔滨 150086哈尔滨师范大学生命科学与技术学院,哈尔滨 150500黑龙江省农业科学院农产品质量安全研究所 农业农村部谷物及制品质量检验测试中心(哈尔滨)国家市场监督管理总局重点实验室(谷物及制品质量与安全),哈尔滨 150086黑龙江省农业科学院农产品质量安全研究所 农业农村部谷物及制品质量检验测试中心(哈尔滨)国家市场监督管理总局重点实验室(谷物及制品质量与安全),哈尔滨 150086黑龙江省农业科学院农产品质量安全研究所 农业农村部谷物及制品质量检验测试中心(哈尔滨)国家市场监督管理总局重点实验室(谷物及制品质量与安全),哈尔滨 150086黑龙江省农业科学院农产品质量安全研究所 农业农村部谷物及制品质量检验测试中心(哈尔滨)国家市场监督管理总局重点实验室(谷物及制品质量与安全),哈尔滨 150086
转基因玉米转化体特异性环介导等温扩增CRISPR/Cas快速检测
transgenic maizeevent-specificityLAMPCRISPR/Cas12arapid detection
《生物技术通报》 2026 (2)
149-157,9
国家市场监督管理总局重点实验室(谷物及制品质量与安全)自立课题(GWZL2025-008),科技创新2030—重大项目子课题(2022ZD040190803),黑龙江省农业科技创新跨越工程农业科技基础创新优青项目(CX22YQ08)
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