甘蓝型油菜BnNAC2转录因子超表达载体构建OA

[目的]构建甘蓝型油菜BnNAC2转录因子超表达载体,有利于分析其对油茶种子含油量的影响.[方法]前期鉴定到一个可能与种子含油量相关的候选转录因子BnNAC2,以甘蓝型油菜(Brassica napus)中双11号为材料,采用PCR技术扩增获得BnNAC2转录因子的CDS序列.利用Gateway克隆技术构建BnNAC2转录因子的植物超表达载体.[结果]BnNAC2转录因子的CDS全长为1 074 bp,编码357个氨基酸.利用生物信息学软件对BnNAC2蛋白质特性进行预测分析,该转录因子编码蛋白质的理论等电点为7.63,分子质量为39 319.26 u,分子式为C1 745H2 645N483O520S19,原子总数为5 412,脂肪系数为57.87,平均疏水性为-0.607,蛋白质不稳定系数为41.66.该蛋白质为亲水性蛋白质,不含信号肽,没有跨膜结构,有1个NAM结构域,其二级结构由无规则卷曲、延伸链和α-螺旋结构组成.[结论]构建了携带增强型35S启动子的超表达载体pEarleyGate101-BnNAC2,为探究BnNAC2转录因子提高甘蓝型油菜种子含油量的功能奠定基础.