基于肠HMGB1/NF-κB/NLRP3通路探讨桃核承气汤改善慢性肾衰竭大鼠微炎症状态的作用机制OA

目的 基于肠HMGB1/NF-κB/NLRP3通路探讨桃核承气汤改善慢性肾衰竭(CRF)大鼠微炎症状态的作用机制.方法 将80只Wistar大鼠按照随机数字表法分为正常组15只、假手术组15只和造模组50只.造模组通过2次手术完成5/6肾切除,假手术组同期进行2次手术,仅剥离双肾被膜及分离肾蒂,不切除肾实质,正常组不做处理.第2次术后第3周,各组大鼠行尾静脉采血,检测血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平.与正常组和假手术组比较,造模组血清Scr和BUN含量均升高(P＜0.01),提示造模成功.造模组造模成功38只,死亡12只.将造模组大鼠按照随机数字表法分为模型组19只和桃核承气汤组19只.第2次术后4周开始干预,桃核承气汤组按10 mL/(kg·d)予以含生药浓度为0.42 g/mL桃核承气汤灌胃,正常组、假手术组和模型组分别予以等剂量生理盐水灌胃,连续干预8周.采用全自动生化分析仪检测血清Scr和BUN含量;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清相关炎症因子[白细胞介素(IL)-6、IL-12、IL-1β、IL-18和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]含量;HE染色及光学显微镜观察肾、肠组织形态;Western blot和实时荧光定量(qPCR)法分别检测4组肠组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核转录因子-κB(NF-κB)和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)的蛋白表达量及其mRNA相对表达水平.结果 与正常组和假手术组比较,模型组血清Scr和BUN含量均升高(P＜0.01),血清IL-6、IL-12、IL-1β、IL-18和TNF-α含量均升高(P＜0.01),光学显微镜下可见肾组织纤维化及炎性损伤明显,肠黏膜结构破坏严重,肠组织HMGB1、TLR4、MyD88、NF-κB和NL-RP3的蛋白表达量及mRNA相对表达水平均升高(P＜0.01);与模型组比较,桃核承气汤组血清Scr和BUN含量均下降(P＜0.01),血清IL-6、IL-12、IL-1β、IL-18和TNF-α的含量均下降(P＜0.01),光学显微镜下可见肾、肠组织病理损伤较模型组明显改善,肠组织HMGB1、TLR4、MyD88、NF-κB和NLRP3的蛋白表达量及mRNA相对表达水平均下降(P＜0.01).结论 桃核承气汤可修复CRF大鼠肠黏膜屏障,改善微炎症状态,减轻肾损害,其机制与调控肠道HMGB1/NF-κB/NLRP3信号通路密切相关.