艾灸治疗伴肥胖斑块型银屑病患者关键差异蛋白测定及验证OA

目的 应用串联质量标签(TMT)方法,对艾灸治疗伴肥胖斑块型银屑病患者测定出关键差异蛋白,并应用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)验证关键差异蛋白质表达情况,筛选潜在候选基因。方法 选取2020年10月—2021年10月期间来自天津市中医药研究院附属医院的18例符合诊断标准的伴肥胖斑块型银屑病住院患者,随机选取9例作为艾灸组,给予常规治疗及艾灸治疗;剩余9例作为非艾灸组,给予常规治疗。均应用TMT方法,对差异蛋白进行生物信息学分析,测定出关键差异蛋白质;又选取来自于体检中心的健康人群9例作为健康人对照组,运用蛋白质印迹法及qPCR检测出艾灸组治疗前后及健康人对照组关键差异蛋白表达量及对应的目的基因表达量,并进行各组比较。结果 通过生物信息学分析,结合银屑病、肥胖的病理生理特点,测定出艾灸组3个关键差异蛋白,均为下调表达,为微管蛋白α-1C链(TUBA1C),微管蛋白α-4A链(TUBA4A),NADH脱氢酶[泛素酮]1β亚复合物亚基11,线粒体(NDUFB11);而非艾灸组中这3个蛋白为非关键差异蛋白。采用qPCR检测这3个基因均有下调的趋势,其中TUBA1C在治疗后表达量更接近健康人对照组;运用蛋白质印迹法检测这3个蛋白表达量均有下降的趋势(均P<0.05),其中只有TUBA1C蛋白在治疗前表达量高于健康人对照组(P<0.05),治疗后低于健康人对照组。结论 艾灸通过下调TUBA1C蛋白,TUBA4A蛋白和NDUFB11蛋白脱氢酶这3个关键差异蛋白,从调节角质形成细胞的分化与增殖,减少受损的线粒体,改善氧化应激反应等方面,起到对银屑病及肥胖共病的治疗作用。通过q PCR方法及蛋白质印迹法,均验证了这3个关键蛋白在艾灸治疗后下调表达的趋势;推测TUBA1C在艾灸治疗伴肥胖银屑病患者中或起到重要作用,可能是银屑病与肥胖共病的潜在候选基因,亦或是艾灸治疗的关键作用靶点。