干姜黄芩黄连人参汤缓解溃疡性结肠炎的机制研究OA

目的探究干姜黄芩黄连人参汤(GD)缓解溃疡性结肠炎(UC)的作用及分子机制。方法32只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、GD低剂量组和高剂量组,每组8只。除对照组外,其余3组使用葡聚糖硫酸钠构建UC模型。低剂量组和高剂量组分别给予8、16 g/kg GD灌胃,对照组和模型组以0.9%氯化钠溶液灌胃,0.08 mL/只,2次/d,连续7 d。测定并比较各组小鼠体重、血糖水平、结肠长度,计算并比较疾病活动指数(DAI);采用苏木精-伊红染色观察小鼠结肠组织形态;蛋白质印迹法检测结肠组织中己糖激酶2(HK2)、乳酸脱氢酶A(LDHA)和葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)蛋白相对表达量。正常结肠上皮细胞系FHC分为对照组、模型组、给药对照组、低剂量组、高剂量组、转染对照组和过表达组,除对照组外,其余6组使用脂多糖构建结肠炎细胞模型。给药对照组使用含20%正常大鼠血清培养基,低剂量组和高剂量组使用10%、20%含药血清培养基,转染对照组和过表达组分别转染对照空质粒和表皮生长因子受体(EGFR)过表达质粒后使用20%含药血清培养基,对照组和模型组使用正常培养基,均培养24 h。使用流式细胞术检测各组细胞凋亡率;蛋白质印迹法检测各组细胞中HK2、LDHA、GLUT1、磷酸化EGFR(p-EGFR)和EGFR蛋白相对表达量。结果与对照组小鼠相比,模型组体重显著下降,血糖水平显著升高,结肠长度明显缩短,DAI评分显著升高(均P<0.05),结肠组织出现明显的隐窝和上皮细胞丢失、炎性细胞浸润和黏膜下水肿,结肠组织中HK2、LDHA和GLUT1蛋白相对表达量均显著升高(均P<0.05);与模型组小鼠相比,低剂量组和高剂量组小鼠体重显著升高,血糖水平显著降低,结肠长度更长,DAI评分显著降低(均P<0.05),结肠组织损伤情况有所改善,结肠组织中HK2、LDHA和GLUT1蛋白相对表达量均显著降低(均P<0.05)。与对照组细胞相比,模型组细胞凋亡率显著上升,HK2、LDHA、GLUT1和p-EGFR蛋白相对表达量均显著升高,EGFR蛋白表达显著降低(均P<0.05);与给药对照组细胞相比,低剂量组和高剂量组细胞凋亡率均显著下降,HK2、LDHA、GLUT1和p-EGFR蛋白相对表达量均显著降低,EGFR蛋白表达均显著升高(均P<0.05);与转染对照组细胞相比,EGFR过表达组细胞凋亡率显著上升,HK2、LDHA、GLUT1、p-EGFR和EGFR蛋白相对表达量均显著升高(均P<0.05)。结论GD对UC有明显的治疗效果,GD可能通过调节EGFR核易位影响葡萄糖代谢,最终缓解UC。